ForeDirect RT-qPCR کٹ
کٹ کی تفصیل:
◮آر این اے پیوریفیکیشن کے عمل کے بغیر جھاڑو کے مجموعوں سے آر این اے کو براہ راست ریئل ٹائم ایمپلیفیکیشن کے لیے۔یہ کٹ ایک گھنٹے میں qRT-PCR سائیکل مکمل کرتی ہے۔انزائم مکس ریورس ٹرانسکرپٹیس، ہاٹ اسٹارٹ ٹاک ڈی این اے پولیمریز، آر نیس انحیبیٹر کا ایک بہترین مرکب ہے۔ری ایکشن بفر میں تمام مطلوبہ اجزاء شامل ہیں، بشمول آپٹمائزڈ بفر اجزاء، ایم جی2+، dUTP، اور dNTPs۔
تفصیل
ForeDirect RT-qPCR Kit RNA پیوریفیکیشن کے عمل کے بغیر جھاڑو جمع کرنے سے RNA براہ راست حقیقی وقت میں اضافہ کے لیے ڈیزائن کیا گیا ہے۔یہ کٹ ایک گھنٹے میں qRT-PCR سائیکل مکمل کرتی ہے۔انزائم مکس ریورس ٹرانسکرپٹیس، ہاٹ اسٹارٹ ٹاک ڈی این اے پولیمریز، آر نیس انحیبیٹر کا ایک بہترین مرکب ہے۔ری ایکشن بفر میں تمام مطلوبہ اجزاء شامل ہیں، بشمول آپٹمائزڈ بفر اجزاء، ایم جی2+، dUTP، اور dNTPs۔
وضاحتیں
100T
کٹ کے اجزاء
| نیوکلک ایسڈ ریلیز ایجنٹ |
| آر این اے محافظ |
| 2× RT-qPCR بفر |
| انزائم مرکب (Taq&M-MLV) |
| ہدایات |
پی سی آر کی درخواست
1. ایک بار جب PCR ری ایکشن ٹیوبیں مختصر طور پر سینٹرفیوج ہو جائیں، تو انہیں ایمپلیفیکیشن آلے کے نمونے کے ٹینک میں رکھیں۔
2. تھرمل پروٹوکول
| قدم | درجہ حرارت | وقت | سائیکل | |
| 1 | ریورس ٹرانسکرپشن | 50℃ | 15 منٹ | 1 |
| 2 | پری ڈینیچریشن | 95℃ | 1 منٹ | 1 |
| 3 | ڈینیچریشن | 95℃ | 10 سیکنڈ | 42 |
| 4 | اینیل/توسیع | 60℃ | 30 سیکنڈ | |
نوٹ:فلوروسینٹ سگنل ہر سائیکل کے توسیعی مرحلے کے فوراً بعد پتہ چلا۔
3. سیٹ کرنے کے بعد فائل کو محفوظ کریں اور ری ایکشن پروگرام چلائیں۔
آپریٹنگ اقدامات
ریجنٹ کی تیاری سے پہلے، کٹ میں موجود تمام ری ایجنٹس کو کمرے کے درجہ حرارت پر پگھلا کر آہستہ سے ملا دینا چاہیے۔
ریجنٹ کی تیاری
1. نیوکلک ایسڈ ریلیز مکس تیار کریں۔
| جزو | حجم فی نمونہ یا کنٹرول |
| نیوکلک ایسڈ ریلیز ایجنٹ | 5μL |
| آر این اے محافظ | 0.5 μL |
2. ری ایکشن مکس تیار کریں۔
| جزو | حجم فی نمونہ یا کنٹرول |
| 2× RT-qPCR بفر | 15 μL |
| انزائم مرکب (Taq&M-MLV) | 1.5 μL |
| پرائمر اور تحقیقات | 1μL |
اسٹوریج اور شیلف زندگی
-کِٹ کو -20 پر ذخیرہ کیا جانا چاہیے۔± 5℃.میعاد کی مدت 12 ماہ ہے۔
بار بار منجمد پگھلنے کے چکروں سے بچیں (<5 سائیکل)۔
