اینیمل ٹشو ڈائریکٹ پی سی آر کٹ-یو این جی (سیمپلنگ ٹولز کے بغیر) پروٹوکول
کٹ کی تفصیل:
پی سی آر ایمپلیفیکیشن کے نمونے کے طور پر جانوروں کے ٹشو لائسیٹ کو براہ راست استعمال کریں، بغیر ڈی این اے کے علیحدہ نکالے، تیز اور زیادہ حساسیت۔غلط مثبت کو ختم کرنے کے لیے UNG انسداد آلودگی کا نظام شامل کیا گیا۔
◮کوئی وقت طلب اور مہنگا ڈی این اے صاف کرنے کی ضرورت نہیں ہے۔
◮نمونے کی مانگ کم ہے، صرف ایک بیج لیں۔
◮پیسنے اور کچلنے جیسے کسی خاص علاج کی ضرورت نہیں ہے، اور آپریشن آسان ہے۔
◮آپٹمائزڈ پی سی آر سسٹم پی سی آر کو اس قابل بناتا ہے کہ وہ پی سی آر ری ایکشن روکنے والوں کے لیے اعلیٰ خصوصیت اور مضبوط رواداری کا حامل ہو۔
تفصیل
یہ کٹ پی سی آر کے رد عمل کے لیے جانوروں کے بافتوں کے نمونوں سے جینومک ڈی این اے کو تیزی سے جاری کرنے کے لیے ایک منفرد لیسیز بفر سسٹم کا استعمال کرتی ہے، اس لیے یہ خاص طور پر بڑے پیمانے پر جینیاتی جانچ کے لیے موزوں ہے۔
لیسیز بفر سے جینومک ڈی این اے کے اخراج کا عمل 65°C پر 10-30 منٹ کے اندر مکمل ہو جاتا ہے۔پروٹین اور آر این اے کو ہٹانے جیسے کسی دوسرے عمل کی ضرورت نہیں ہے، اور جاری کردہ ٹریس ڈی این اے کو پی سی آر کے رد عمل کے سانچے کے طور پر استعمال کیا جا سکتا ہے۔
2×PCR آسانTMمکس (UNG) 2×PCR ایزی کی بنیاد پر dTTP کے بجائے dUTP استعمال کرتا ہے۔TMملائیں، اور UNG انزائم (Uracil-N-glycosylase) جوڑتا ہے جو ایک ہی وقت میں dUTP پر مشتمل ٹیمپلیٹ کو خراب کر سکتا ہے۔پی سی آر ردعمل سے پہلے، یو این جی انزائم کا استعمال پی سی آر پروڈکٹ کو کم کرنے کے لیے کیا جاتا ہے جس میں uracil ہوتا ہے۔UNG انزائم کا اس ٹیمپلیٹ پر کوئی اثر نہیں پڑے گا جس میں uracil شامل نہیں ہے، اس طرح بڑے پیمانے پر جینیاتی جانچ کے دوران پی سی آر مصنوعات کی آلودگی کے امکان کو روکنے اور پرورش کی خاصیت اور درستگی کو یقینی بناتا ہے۔
D-Taq DNA پولیمریز ایک DNA پولیمریز ہے جو خاص طور پر Foregene کے ذریعے براہ راست PCR کے رد عمل کے لیے تیار کیا گیا ہے۔D-Taq DNA پولیمریز مختلف قسم کے PCR ردعمل روکنے والوں کے لیے مضبوط رواداری رکھتا ہے، اور مختلف پیچیدہ رد عمل کے نظاموں میں DNA کی ٹریس مقدار کو مؤثر طریقے سے بڑھا سکتا ہے، اور ایمپلیفیکیشن کی رفتار 2Kb/منٹ تک پہنچ سکتی ہے، جو خاص طور پر براہ راست PCR ردعمل کے لیے موزوں ہے۔
کٹ کے اجزاء
| حصہ اول | بفر AL |
| فارجین پروٹیز | |
| 6× DNA لوڈنگ بفر | |
| حصہ دوم | 2×PCR آسانTMمکس (UNG) |
خصوصیات اور فوائد
■کوئی وقت طلب اور مہنگا ڈی این اے پیوریفیکیشن نہیں۔
■ نمونے کی طلب کم ہے، 5mg سے کم جانوروں کے ٹشوز کی جانچ کی جا سکتی ہے۔
■ کسی خاص علاج جیسے پیسنے اور کچلنے کی ضرورت نہیں ہے، اور آپریشن آسان ہے۔
■ آپٹمائزڈ پی سی آر سسٹم پی سی آر کو اعلی خصوصیت اور پی سی آر ری ایکشن روکنے والوں کے لیے مضبوط رواداری کا حامل بناتا ہے۔
■ انسداد آلودگی PCR سسٹم 2×پی سی آر آسانTMمکس (UNG) PCR مصنوعات کی وجہ سے ہونے والی آلودگی کو مؤثر طریقے سے ختم کرتا ہے اور امپلیفیکیشن کی مخصوصیت اور درستگی کو یقینی بناتا ہے۔
کٹ کے پیرامیٹرز
درخواست: جانوروں کے ٹشوز کی ایک قسم۔
ڈی این اے نمونہ لیسس سے جاری کیا گیا: صرف پی سی آر ٹیمپلیٹ کے طور پر استعمال ہوتا ہے۔
کٹ کو درج ذیل مقاصد کے لیے استعمال کیا جا سکتا ہے: ٹرانسجیناسس کی شناخت، جانوروں کی جین ٹائپنگ وغیرہ۔
کام کا بہاؤ
اسٹوریج اور شیلف زندگی
اس کٹ کا حصہ I 2-8 پر ذخیرہ کیا جانا چاہئے۔℃.
ریجنٹ بفر AL کو خشک حالات میں 12 ماہ تک ذخیرہ کیا جا سکتا ہے۔یہ 2-8 پر ذخیرہ کیا جا سکتا ہے℃طویل اسٹوریج کے لئے.
Reagent Foregene Protease کا ایک منفرد فارمولا ہے۔اس کی سرگرمی اور استحکام کو یقینی بنانے کے لیے، براہ کرم اسے 4 پر اسٹور کریں۔℃12 ماہ کے لئے.
ریجنٹ 6×ڈی این اے لوڈنگ بفر کو 4 پر ذخیرہ کیا جا سکتا ہے۔℃یا -20℃ایک طویل وقت کے لئے.
اس کٹ کا حصہ II -20 پر ذخیرہ کیا جانا چاہئے۔℃.
ریجنٹ 2×پی سی آر آسانTMمکس (UNG)، اگر اسے کثرت سے استعمال کیا جائے تو اسے 4 پر بھی ذخیرہ کیا جا سکتا ہے۔℃قلیل مدتی اسٹوریج کے لیے (10 دن کے اندر استعمال کریں)۔
