ڈائریکٹ RT-qPCR کٹ III
کٹ کی تفصیل:
◮ڈائریکٹ RT-qPCR Kit، Foreasy Reverse Transcriptase اور Foreasy HS Taq DNA Polymerase کا استعمال کرتے ہوئے Foregene کے ذریعے تیار کردہ، منفرد ری ایکشن بفر کے ساتھ، اس کٹ کو مضبوط مزاحمت اور مطابقت کے ساتھ بناتا ہے، اور یہ براہ راست رد عمل کی جانچ کر سکتا ہے Foregene Lysis سسٹم کو بطور ٹیمپلیٹ۔یہ کٹ COVID-19 نیوکلک ایسڈ کا پتہ لگانے والی کٹ اور دیگر پیتھوجینک بیکٹیریا نیوکلک ایسڈ کا پتہ لگانے والی کٹ تیار کرنے کے لیے درخواست دے سکتی ہے۔
تفصیل
ڈائریکٹ RT-qPCR کٹ الگ سے پیک شدہ RT-qPCR بفر فراہم کرتی ہے (فوری HS Taq DNA پولیمریز مکسڈ کے ساتھ) اور اعلیٰ موثرفارسی ریورس ٹرانسکرپٹیس (MMLV)،اسے بیک اینڈ کٹس بنانے اور سسٹم ایڈجسٹمنٹ کے لیے آسان بنانا، آسان تصدیق کے اندر۔
ڈائریکٹ RT-qPCR Kit، Foreasy Reverse Transcriptase اور Foreasy HS Taq DNA Polymerase کا استعمال کرتے ہوئے Foregene کے ذریعے تیار کردہ، منفرد ری ایکشن بفر کے ساتھ، اس کٹ کو مضبوط مزاحمت اور مطابقت کے ساتھ بناتا ہے، اور یہ براہ راست رد عمل کی جانچ کر سکتا ہے Foregene Lysis سسٹم کو بطور ٹیمپلیٹ۔یہ کٹ COVID-19 نیوکلک ایسڈ کا پتہ لگانے والی کٹ اور دیگر پیتھوجینک بیکٹیریا نیوکلک ایسڈ کا پتہ لگانے والی کٹ تیار کرنے کے لیے درخواست دے سکتی ہے۔
یہ کٹ آسانی سے اور تیز استعمال کرتے ہوئے براہ راست IVD پروڈکٹ کا جزو بن سکتی ہے۔اسے دوبارہ ترقی کیے بغیر صرف آسان تصدیق کی ضرورت ہے۔
وضاحتیں
500T، 50,000T
کٹ کے اجزاء
| کٹ کا مواد (20 μL رد عمل کا نظام) | IM-05111-03 | IM-05112-03 |
| 500 ٹی | 50,000 T | |
| فارسی آرالٹی ٹرانسکرپٹس(200 یو/μL) | 50 μL×1 | 1 ملی لیٹر×5 |
| 2× ڈائریکٹ کیو پی سی آرمکس-تقمان | 1 ملی لیٹر × 5 | 500 ملی لیٹر×1 |
| ہدایت | 1 | 1 |
آپریٹنگ اقدامات
A: ٹیمپلیٹ اور ری ایجنٹ کی تیاری
1. تیار شدہ آر این اے ٹیمپلیٹ تیار کریں (آر این اے ٹیمپلیٹ کو نکالنے اور صاف کرنے کے لیے فورجین ٹوٹل آر این اے آئسولیشن کٹ سیریز کٹ استعمال کرنے کی سفارش کی جاتی ہے) یا نمونہ کریکنگ پروڈکٹ (فورجین لائسس سسٹم استعمال کرنے کی سفارش کی جاتی ہے)، مخصوص پرائمر (10 μM) اور دیگر متعلقہ استعمال کی اشیاء، آلہ۔
2. 2× ڈائریکٹ RT-qPCR بفر، RNase-Free ddH2O اور 20× ROX ریفرنس ڈائی (اگر ضرورت ہو) کو برف کے ساتھ باکس میں رکھیں، ان کو قدرتی طور پر پگھلائیں، اور آہستہ سے مکس کریں۔
B: RT-qPCR سسٹم کی تیاری
ری ایکشن سسٹم کے ری ایکشن بفر کا نصف حجم حاصل کریں (مثال کے طور پر، اگر سسٹم کا حجم 20 μL ہے، تو اسے 10 μL 2× Direct RT-qPCR بفر حاصل کرنے کی ضرورت ہے۔). کے لیےانزائم کی متعلقہ مقدار، ہم تجویز کرتے ہیں۔M-MLV: 10-30 U/20 μL رد عمل کا نظام,طاقڈی این اے پولیمریز：1-2 U/20 μL رد عمل کا نظامیہ ہماری تجویز ہے، آپ اسے جانچ کر ایڈجسٹ کریں۔)، RNA ٹیمپلیٹ، مخصوص پرائمر اور تحقیقات شامل کریں، اور RNase-Free ddH شامل کریں۔2O سے 20 μL۔RT-qPCR رد عمل کے نظام کی مخصوص تیاری کو درج ذیل جدول 1 کا حوالہ دیا جا سکتا ہے۔
جدول 1: RT-qPCR سسٹم کی تیاری
| جزو | حجم | حتمی ارتکاز |
| 2× ڈائریکٹ RT-qPCR بفر | 10 μL | 1× |
| فارسی ریورس ٹرانسکرپٹیس (MMLV) | 10-30 U | |
| Foreasy HS Taq DNA پولیمریز | 1-2 یو | |
| فارورڈ پرائمر (10 μM) | 0.8 μL | 50-900nM |
| ریورس پرائمر (10 μM) | 0.8 μL | 50-900nM |
| تحقیقات (4 μM) | 1 μL | 200nM |
| سانچہ(RNA یا Lysate) | X μL | |
| 20× ROX حوالہ رنگ | - | 1* |
| RNase-FreeddH2O | (6.4-X) μL | |
| مکمل حجم | 20 μL |
نوٹ: فارورڈ پرائمر اور ریورس پرائمر ٹارگٹ جین کے مخصوص پرائمر ہیں۔کیو پی سی آر کے نظام کو عملی تجرباتی اور پی سی آر ماڈلز کے مطابق ایڈجسٹ کیا جا سکتا ہے۔ہم زیادہ تر پرائمر کے حتمی ارتکاز کے لیے 400nM تجویز کرتے ہیں۔مخصوص پرائمر اور پروبز کے حجم کو تیار شدہ ارتکاز اور تجویز کردہ حتمی ارتکاز کے مطابق ایڈجسٹ کریں۔
1*: مختلف مقداری پی سی آر آلات کے مطابق ROX ریفرنس ڈائی کا مناسب حتمی ارتکاز منتخب کریں۔عام مقداری پی سی آر آلات کی بہترین ROX حوالہ ڈائی ارتکاز کو مندرجہ ذیل جدول میں دکھایا گیا ہے:
| مقداری پی سی آر آلات | ROX حوالہ ڈائی کا حتمی ارتکاز |
| ABI PRISM 7000/7300/7700/7900HT/Step One,وغیرہ | 1× (مثال کے طور پر، 20 μL ردعمل کے نظام میں 1μl 20×ROX حوالہ رنگ شامل کریں) |
| ABI 7500, 7500 Fast, Stratagene Mx3000P, Mx3005P اور Mx4000, وغیرہ۔ | 0.5× (مثال کے طور پر، 20 μL ردعمل کے نظام میں 0.5μl 20×ROX حوالہ رنگ شامل کریں) |
| Roche PCR آلہ، Bio-Rad PCR آلہ، Eppendorf مقداری PCR آلہ، وغیرہ۔ | ROX حوالہ ڈائی کے بغیر |
اسٹوریج اور شیلف زندگی
کٹ کو -20 ± 5℃ پر ذخیرہ کیا جانا چاہیے۔اسے فوری طور پر -20 ℃ تھرموسٹیٹک ریفریجریٹر میں محفوظ کیا جانا چاہیے۔اگر اسے مناسب حالت میں ذخیرہ کیا جائے تو اس کی مدت 2 سال ہے۔
