تنظیم طریقہ کار کے تصور کو برقرار رکھتی ہے "سائنسی انتظام، اعلیٰ معیار اور کارکردگی کی ترجیح، چین مینوفیکچرر کے لیے خریدار سپریم 2× غیر صاف شدہ نمونے کے لیے مرتکز پریمکس کے لیے ریئل ٹائم کوانٹیٹیٹو PCR ڈائریکٹ ملٹی پلیکس پروب Qpcr Mix Plus U، ہمارا کاروبار صارفین کو ہر ایک اہم اور محفوظ قیمت پر اعلیٰ معیار کی مصنوعات فراہم کرنے کے لیے وقف ہے۔
تنظیم طریقہ کار کے تصور کو برقرار رکھتی ہے "سائنسی انتظام، اعلی معیار اور کارکردگی کی ترجیح، خریداروں کے لیے اعلیٰچائنا ٹاک ڈی این اے پولیمریز اور کیو پی سی آر، ہماری کمپنی وافر طاقت رکھتی ہے اور اس کے پاس ایک مستحکم اور کامل سیلز نیٹ ورک سسٹم ہے۔ہماری خواہش ہے کہ ہم باہمی فوائد کی بنیاد پر اندرون و بیرون ملک کے تمام صارفین کے ساتھ اچھے کاروباری تعلقات قائم کر سکیں۔
ریئل ٹائم پی سی آر پرائمر ڈیزائن کے اصول

فارورڈ پرائمر اور ریورس پرائمر

ریئل ٹائم پی سی آر کے لیے، پرائمر ڈیزائن بہت اہم ہے۔پرائمر کا تعلق پی سی آر ایمپلیفیکیشن کی خاصیت اور کارکردگی سے ہے، اور اسے درج ذیل اصولوں کے حوالے سے ڈیزائن کیا جا سکتا ہے۔

• پرائمر کی لمبائی: 18-30bp۔
• جی سی مواد: 40-60٪۔
• ٹی ایم ویلیو: پرائمر ڈیزائن سافٹ ویئر، جیسے پرائمر 5، پرائمر کی ٹی ایم ویلیو دے سکتا ہے۔اپ اسٹریم اور ڈاون اسٹریم پرائمر کی Tm قدریں زیادہ سے زیادہ قریب ہونی چاہئیں۔Tm حساب کا فارمولا بھی استعمال کیا جا سکتا ہے: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T)۔PCR کو انجام دیتے وقت، 5 °C کی پرائمر Tm قدر سے کم درجہ حرارت کو عام طور پر اینیلنگ درجہ حرارت کے طور پر منتخب کیا جاتا ہے (اینیلنگ درجہ حرارت میں اسی طرح کا اضافہ PCR ردعمل کی خصوصیت کو بڑھا سکتا ہے)۔
• پرائمر اور پی سی آر مصنوعات:

1. ڈیزائن پرائمر پی سی آر ایمپلیفیکیشن مصنوعات کی لمبائی ترجیحاً 100-150bp ہے۔
2. ٹیمپلیٹ کے ثانوی ساختی علاقے میں ڈیزائن پرائمر سے جتنا ممکن ہو گریز کیا جانا چاہیے۔
3. اپ اسٹریم اور ڈاون اسٹریم پرائمر کے 3′ سروں کے درمیان 2 یا زیادہ تکمیلی بنیادوں کی تشکیل سے گریز کریں۔
4. پرائمر 3′ ٹرمینل بیس 3 اضافی مسلسل G یا C کے ساتھ موجود نہیں ہو سکتا۔
5. پرائمر خود تکمیلی ڈھانچے نہیں رکھ سکتے ہیں، ورنہ بالوں کے پین کا ڈھانچہ بن جائے گا، جس سے پی سی آر ایمپلیفیکیشن متاثر ہوگا۔
6. ATCG کو پرائمر کی ترتیب میں جتنا ممکن ہو یکساں طور پر تقسیم کیا جانا چاہیے، اور 3′ ٹرمینل بیس کو T کے طور پر گریز کیا جانا چاہیے۔

اپینڈکس1: سیبراہ راستRT-qPCR کٹ کا جزوٹی سپلیمنٹ پیک

1. سیل لیسس حل

 تنظیم طریقہ کار کے تصور کو برقرار رکھتی ہے "سائنسی انتظام، اعلیٰ معیار اور کارکردگی کی ترجیح، چین مینوفیکچرر کے لیے خریدار سپریم 2× غیر صاف شدہ نمونے کے لیے مرتکز پریمکس کے لیے ریئل ٹائم کوانٹیٹیٹو PCR ڈائریکٹ ملٹی پلیکس پروب Qpcr Mix Plus U، ہمارا کاروبار صارفین کو ہر ایک اہم اور محفوظ قیمت پر اعلیٰ معیار کی مصنوعات فراہم کرنے کے لیے وقف ہے۔
کے لئے چین ڈویلپرچائنا ٹاک ڈی این اے پولیمریز اور کیو پی سی آر، ہماری کمپنی وافر طاقت رکھتی ہے اور اس کے پاس ایک مستحکم اور کامل سیلز نیٹ ورک سسٹم ہے۔ہماری خواہش ہے کہ ہم باہمی فوائد کی بنیاد پر اندرون و بیرون ملک کے تمام صارفین کے ساتھ اچھے کاروباری تعلقات قائم کر سکیں۔

ریئل ٹائم پی سی آر پرائمر ڈیزائن کے اصول

فارورڈ پرائمر اور ریورس پرائمر

ریئل ٹائم پی سی آر کے لیے، پرائمر ڈیزائن بہت اہم ہے۔پرائمر کا تعلق پی سی آر ایمپلیفیکیشن کی خاصیت اور کارکردگی سے ہے، اور اسے درج ذیل اصولوں کے حوالے سے ڈیزائن کیا جا سکتا ہے۔

• پرائمر کی لمبائی: 18-30bp۔
• جی سی مواد: 40-60٪۔
• ٹی ایم ویلیو: پرائمر ڈیزائن سافٹ ویئر، جیسے پرائمر 5، پرائمر کی ٹی ایم ویلیو دے سکتا ہے۔اپ اسٹریم اور ڈاون اسٹریم پرائمر کی Tm قدریں زیادہ سے زیادہ قریب ہونی چاہئیں۔Tm حساب کا فارمولا بھی استعمال کیا جا سکتا ہے: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T)۔PCR کو انجام دیتے وقت، 5 °C کی پرائمر Tm قدر سے کم درجہ حرارت کو عام طور پر اینیلنگ درجہ حرارت کے طور پر منتخب کیا جاتا ہے (اینیلنگ درجہ حرارت میں اسی طرح کا اضافہ PCR ردعمل کی خصوصیت کو بڑھا سکتا ہے)۔
• پرائمر اور پی سی آر مصنوعات:

1. ڈیزائن پرائمر پی سی آر ایمپلیفیکیشن مصنوعات کی لمبائی ترجیحاً 100-150bp ہے۔
2. ٹیمپلیٹ کے ثانوی ساختی علاقے میں ڈیزائن پرائمر سے جتنا ممکن ہو گریز کیا جانا چاہیے۔
3. اپ اسٹریم اور ڈاون اسٹریم پرائمر کے 3′ سروں کے درمیان 2 یا زیادہ تکمیلی بنیادوں کی تشکیل سے گریز کریں۔
4. پرائمر 3′ ٹرمینل بیس 3 اضافی مسلسل G یا C کے ساتھ موجود نہیں ہو سکتا۔
5. پرائمر خود تکمیلی ڈھانچے نہیں رکھ سکتے ہیں، ورنہ بالوں کے پین کا ڈھانچہ بن جائے گا، جس سے پی سی آر ایمپلیفیکیشن متاثر ہوگا۔
6. ATCG کو پرائمر کی ترتیب میں جتنا ممکن ہو یکساں طور پر تقسیم کیا جانا چاہیے، اور 3′ ٹرمینل بیس کو T کے طور پر گریز کیا جانا چاہیے۔

اپینڈکس1: سیبراہ راستRT-qPCR کٹ کا جزوٹی سپلیمنٹ پیک

1. سیل لیسس حل

ہدایت نامہ:

 کوئیک ایزی سیل ڈائریکٹ RT-qPCR کٹ-تقمان