ایم آر این اے ویکسین کیا ہے؟
ایم آر این اے ویکسین وٹرو میں متعلقہ ترمیم کے بعد پروٹین اینٹیجنز کو ظاہر کرنے اور پیدا کرنے کے لیے آر این اے کو جسم کے خلیوں میں منتقل کرتی ہے، اس طرح جسم کو اینٹیجن کے خلاف مدافعتی ردعمل پیدا کرنے میں مدد ملتی ہے، اس طرح جسم کی مدافعتی صلاحیت میں اضافہ ہوتا ہے۔[1,3].
شکل 1: mRNA ویکسین کے براہ راست انجیکشن کے اثر کا اسکیمیٹک خاکہ [2]
ایم آر این اے ویکسین کی درجہ بندی
mRNA ویکسین کو دو اقسام میں تقسیم کیا گیا ہے:غیر نقل کرنے والاmRNA اورخود کو بڑھانے والاmRNA: سیلف ایمپلیفائنگ mRNA نہ صرف ٹارگٹ اینٹیجن کو انکوڈ کرتا ہے بلکہ نقل کو بھی انکوڈ کرتا ہے جو انٹرا سیلولر RNA ایمپلیفیکیشن اور پروٹین ایکسپریشن میکانزم کو قابل بناتا ہے۔غیر نقل کرنے والی ایم آر این اے ویکسین صرف ٹارگٹ اینٹیجنز کو انکوڈ کرتی ہیں اور ان میں 5'اور 3'غیر ترجمہ شدہ ریجنز (UTR) ہوتے ہیں۔وہ موافقت اور فطری قوت مدافعت کا جامع محرک فراہم کرتے ہیں، یعنی سیٹو اینٹیجن اظہار اور خطرے کے سگنل کی ترسیل میں، اور ان میں درج ذیل ایپلی کیشنز کی خصوصیات ہیں۔[2,3]
● موافقت اور فطری استثنیٰ کی جامع محرک فراہم کر سکتا ہے، یعنی سیٹو اینٹیجن اظہار اور خطرے کے سگنل کی ترسیل میں
● ایک "متوازن" مدافعتی ردعمل پیدا کر سکتا ہے، بشمول مزاحیہ اور سیلولر اثر اور مدافعتی یادداشت
● ویکسین کی تشکیل کی پیچیدگی میں اضافہ کیے بغیر مختلف اینٹیجنز کو یکجا کر سکتے ہیں۔
● مدافعتی صلاحیت میں مسلسل بہتری کو بار بار ویکسینیشن کے ذریعے حاصل کیا جا سکتا ہے، اور کیریئر کے لیے کوئی یا کم مدافعتی ردعمل نہیں ہوتا ہے۔
●گرمی سے مستحکم ایم آر این اے ویکسین ویکسین کی نقل و حمل اور ذخیرہ کو آسان بنا سکتی ہیں
شکل 2: mRNA ویکسین کا اسکیمیٹک خاکہ اور اس کے اینٹیجن اظہار کا طریقہ کار [4]
ایم آر این اے ویکسین کی خصوصیات
روایتی ویکسین کے مقابلے میں، mRNA ویکسین میں سادہ پیداواری عمل، تیز نشوونما کی رفتار، سیل کلچر کی ضرورت نہیں، اور کم قیمت ہوتی ہے۔ڈی این اے ویکسین کے مقابلے میں، ایم آر این اے ویکسین کو نیوکلئس میں داخل ہونے کی ضرورت نہیں ہے اور میزبان جینوم میں انضمام کا کوئی خطرہ نہیں ہے۔نصف زندگی کو ترمیم کے ذریعہ ایڈجسٹ کیا جاسکتا ہے۔
جدول 1: mRNA ویکسین کے فوائد اور نقصانات
|
| فائدہ | کوتاہی |
| ایم آر این اے ویکسین | تیز رفتار تحقیق اور ترقی، ویکسین کی تیاری میں صرف 40 دن لگتے ہیں۔ | غیر ضروری مدافعتی ردعمل کو متحرک کریں۔
|
| جسمانی حالات کے تحت mRNA عدم استحکام، انحطاط کرنا آسان ہے۔ | ممکنہ علاجاتی تغیرات سے بچنے کے لیے جینوم میں ضم نہیں ہوں گے۔
| |
| کسی جوہری لوکلائزیشن سگنل، نقل کی ضرورت نہیں ہے۔ | حفاظتی جوہری کی تاثیر کی تصدیق کرنا باقی ہے۔
|
شکل 3: mRNA ویکسین کی تیاری اور تیاری کا فلو چارٹ [4]
فورجین وائرل آر این اے آئسولیشن کٹ
RT-qPCR آسان (ایک قدم)
ایم آر این اے ویکسین کی تیاری کے لیے بہتر حکمت عملی
خود mRNA کے کمزور استحکام، ٹشوز میں نیوکلیز کے ذریعے آسانی سے انحطاط، خلیے میں داخلے کی کم کارکردگی، اور کم ترجمے کی کارکردگی کی وجہ سے، یہ نقائص mRNA ویکسین کے اطلاق کو محدود کرتے ہیں۔ترجمہ کی کارکردگی بھی بہت اہم کردار ادا کرتی ہے۔ڈلیوری گاڑیوں کو وائرل ویکٹر اور غیر وائرل ویکٹر میں تقسیم کیا جا سکتا ہے (بشمول لیپوسومز، نان لیپوسومز، وائرس، نینو پارٹیکلز وغیرہ)۔اس لیے متعلقہ بہتری کے اقدامات کی ضرورت ہے۔ایم آر این اے کی تیاری کے لیے فارماسولوجیکل بہتری کی حکمت عملی درج ذیل ہے۔[2]
1 کیپ اینالاگ کی ترکیب کریں یا ایم آر این اے کو مستحکم کرنے کے لیے کیپنگ انزائمز کا استعمال کریں اور یوکرائیوٹک ٹرانسلیشن انیشیشن فیکٹر 4E (EIF4E) سے منسلک ہو کر پروٹین ٹرانسلیشن میں اضافہ کریں۔
2 5′-غیر ترجمہ شدہ خطے (UTR) اور 3′-UTR کے عناصر کو mRNA کو مستحکم کرنے اور پروٹین کے ترجمہ کو بڑھانے کے لیے ایڈجسٹ کریں۔
3 Poly(A) ٹیل کو شامل کرنے سے mRNA کو مستحکم کیا جا سکتا ہے اور پروٹین کا ترجمہ بڑھ سکتا ہے۔
4 ترمیم شدہ نیوکلیوسائیڈز فطری قوت مدافعت کو کم کرنے اور ترجمہ کو بڑھانے کے لیے
5 RNase III اور تیز پروٹین مائع کرومیٹوگرافی (FPLC) پیوریفیکیشن کے ساتھ علاج مدافعتی ایکٹیویشن کو کم کر سکتا ہے اور ترجمہ کو بڑھا سکتا ہے۔
6 ترجمے کو بڑھانے کے لیے ترتیب یا کوڈنز کو بہتر بنائیں
7 ترجمے کے آغاز کے عوامل اور ترجمے اور مدافعتی صلاحیت کو تبدیل کرنے کے دیگر طریقوں کی مشترکہ ترسیل
شکل 4: ان وٹرو ٹرانسکرپشن (IVT) mRNA کی پیداوار اور اسمبلی کا عمل [5]
پلازمیڈ ڈی این اے کی بڑے پیمانے پر تیاری
پلاسمڈ ڈی این اے پیوریفیکیشن بنیادی طور پر آر این اے، اوپن سرکل ڈی این اے اینڈوٹوکسین، میزبان پروٹین اور میزبان نیوکلک ایسڈ جیسے آلودگیوں کو ہٹاتا ہے، اور عام طور پر ریکومبیننٹ پلاسمڈ کو ای کولی میں تبدیل کرتا ہے۔E. coli اعلی کثافت کے ابال سے گزرتا ہے، پھر ٹھوس مائع کی علیحدگی، اور E. کولی کو جمع کرتا ہے۔اس کے بعد E. کولی کو الکلائن lysis، سینٹرفیوگل ٹھوس مائع علیحدگی اور lysis کے بعد مائکرو فلٹریشن کی وضاحت، الٹرا فلٹریشن اور وضاحت کے بعد ارتکاز، اور پھر کرومیٹوگرافک پیوریفیکیشن کا نشانہ بنایا جاتا ہے۔
پلازمیڈ ڈی این اے کی صفائی:
فارجین جنرل پلازمیڈ منی کٹ
【1】苗鹤凡, 郭勇, 江新香.ایم آر این اے疫苗研究进展及挑战[جے]۔免疫学杂志, 2016(05):446-449۔
【2】پارڈی این، ہوگن ایم جے، پورٹر ایف ڈبلیو، وغیرہ۔mRNA ویکسین - ویکسینولوجی میں ایک نیا دور [J]۔نیچر ریویو ڈرگ ڈسکوری، 2018۔
【3】Kramps T., Elbers K. (2017) RNA ویکسین کا تعارف۔میں: Kramps T., Elbers K. (eds) RNA ویکسینز۔سالماتی حیاتیات میں طریقے، والیم 1499۔ ہیومان پریس، نیویارک، نیو یارک۔
【4】ماروگی جی، ژانگ سی، لی جے، وغیرہ۔متعدی بیماریوں پر قابو پانے کے لیے ویکسین کی ترقی کے لیے ایک تبدیلی کی ٹیکنالوجی کے طور پر mRNA۔مالیکیولر تھراپی، 2019۔
【5】Sergio Linares-Fernández, Céline Lacroix, ,Tiloring mRNA Vaccine to Balance Innate/Adaptive Immune Response, Trends in Molecular Medicine, جلد 26, شمارہ 3,2020, صفحات 311-323۔
پوسٹ ٹائم: اگست 05-2021
