نیوکلک ایسڈ نکالنا سالماتی حیاتیات کے تجربات کے لیے ایک تعارفی مہارت ہے۔آیا یہ اس ہنر میں مہارت حاصل کر سکتا ہے اور اسے مہارت کے ساتھ استعمال کر سکتا ہے، یہ بھی بعد کے تجربہ کاروں کے لیے تجرباتی ماسٹرز میں اپ گریڈ کرنے کے لیے ایک شرط بن گیا ہے۔
مختلف تحقیقی مواد کے مطابق، تجربہ کاروں کو بنیادی طور پر درج ذیل تین اقسام میں تقسیم کیا گیا ہے۔
جانوروں کا اہم، پلانٹ میجر، مائکرو بایولوجی میجر
ہر قسم کا تجربہ کار مخصوص نمونوں کے لیے خصوصی مہارتوں کا ایک سیٹ تیار کرنے کے لیے کاپیوں کی نقل جاری رکھے گا۔
آج، ایڈیٹر تجربہ کاروں کے لیے کچھ آلات اور سہارے لانا چاہتا ہے جو تہھانے کے ذریعے دستیاب نہیں ہیں۔ان کے ساتھ، آپ تیزی سے تمام سمتوں میں اپ گریڈ کر سکتے ہیں۔تجرباتی خدا بننا کوئی خواب نہیں ہے۔
یہ مسئلہ پودوں کے پیشہ ور تجربہ کاروں کے لیے ہے (دوسرے پیشوں کے تجربہ کار بھی اس سے سیکھ سکتے ہیں~)۔
مجھے یقین ہے کہ تجربہ کاروں کی ہر نسل نے کلاسک پلانٹ کے نیوکلک ایسڈ نکالنے کے طریقوں کے بارے میں سنا ہوگا جو ان کے پیشروؤں سے نسل در نسل منتقل ہوئے ہیں۔پلانٹ نکالنے کی صنعت میں تین بڑے نام۔
اگرچہ بڑے لوگ بہترین ہیں، پھر بھی ان میں کچھ ناگزیر کوتاہیاں ہیں۔
TRIzol طریقہ
اکثر نکالنے کے لئے استعمال کیا جاتا ہے
آر این اے
● زہریلا اور بوجھل
● جینوم کی آلودگی پر مشتمل
CTAB طریقہ
اکثر نکالنے کے لئے استعمال کیا جاتا ہے
جینومڈی این اے
● وقت لگتا ہے۔
● نمک سے زیادہ دھونے سے CTAB کو ہٹانا زیادہ مشکل ہے، تھوڑی مقدار میں باقیات کا انزائم کی سرگرمی پر بہت زیادہ اثر پڑے گا۔
ایس ڈی ایس کا طریقہ
اکثر نکالنے کے لئے استعمال کیا جاتا ہے
پلازمیڈ
● اعلی پولی سیکرائیڈ مواد والے پودوں کے لیے موزوں نہیں ہے۔
●پروٹین کی آلودگی
اس جدید معاشرے میں دوہری رفتار سے اپ ڈیٹ کی تکرار کے ساتھ، آپریشن کے روایتی طریقے اب تجربہ کاروں کی ضروریات کو پورا کرنے کے قابل نہیں ہیں، اور آلات کی اپ گریڈیشن قریب ہے۔
Foregene Nucleic Acid Extraction Kit کا درجنوں تجربہ کاروں کے ذریعے N بار تجربہ کیا جا چکا ہے۔یہ کام کرنا آسان ہے، کوئی زہریلے ری ایجنٹس کا استعمال نہیں کرتا، اور کوئی انزائم شامل نہیں کرتا ہے۔حاصل کردہ نیوکلک ایسڈ اعلیٰ پاکیزگی کا ہے، جو بہترین تجربہ کاروں کے روزانہ نکالنے کے آپریشن کے لیے ضروری ہے۔
فارجین آر این اے آئسولیشن کٹ
یہاں، میں تجربہ کاروں کو آپریشن کی ایک چھپی ہوئی تکنیک بھی بتاؤں گا، جو کہ پودوں کی قسم کے مطابق نکالنے کے مناسب طریقہ کا انتخاب کرنا ہے (پودے کی قسم کا تعین کرنے کا طریقہ مضمون کے آخر میں ہے!)، کیونکہ کچھ پودوں میں پولی سیکرائڈز اور پولی فینولز زیادہ ہوتے ہیں، اور روایتی طریقے مہلک ہوتے ہیں۔کنٹرول کرنے کے لیے کافی نہیں۔
ٹھیک ہے، یہ اس طرح ہے ...
TRIzol طریقہ پولی سیکرائڈز اور پولی فینول کی اعلی سطح کے ساتھ نمونوں کے نیچے براہ راست گھٹنے ٹیکتا ہے جیسے کیلے کے پتے، جِنکگو کے پتے اور کپاس کے پتے۔
اس مقصد کے لیے، Foregene نے تجربہ کاروں کے لیے دو موثر اوزار تیار کیے ہیں۔کم پولی سیکرائیڈ اور پولی فینول مواد اور اعلی پولی سیکرائیڈ اور پولی فینول مواد کے ساتھ پلانٹ کی آر این اے ایکسٹرکشن کٹ دشمنوں کو ہدفی انداز میں مار سکتی ہے، تاکہ تجربہ کار مختلف پودوں سے خوفزدہ نہ ہوں۔صرف سامان کو براہ راست تبدیل کریں!
نکالنے کے طریقہ کار کو اپ گریڈ کرنے کی ضرورت کے علاوہ، نمونہ پری پروسیسنگ آپریشنز کو بھی اپ گریڈ کرنے کی ضرورت ہے۔
پودوں کے نمونوں کی خاص ساخت کی وجہ سے، کچھ پودوں کی جڑیں اور سخت تنوں کو یکساں طور پر پیسنا اور کچلنا زیادہ مشکل ہوتا ہے۔
پیسنے کی صنعت میں، تقریباً 80% لوگ پیسنے کے لیے مائع نائٹروجن کا استعمال کرتے ہیں، جب کہ 20% سے کم لوگ الیکٹرک گرائنڈنگ اور پیسنے والی مالا کے دوغلے استعمال کرتے ہیں۔
اگرچہ مائع نائٹروجن پیسنا سستا اور استعمال میں آسان ہے، لیکن یہ تجربہ کاروں کے لیے ایک ڈراؤنا خواب ہے جس میں ہر بار اور کوشش کو پیسنے کے لیے نمونے کی بڑی مانگ ہوتی ہے!اگر مارٹر کو صاف نہیں کیا جاتا ہے، تو یہ نمونوں کے درمیان کراس آلودگی کا سبب بنے گا۔
الیکٹرک گرائنڈنگ کا اثر ہر شخص میں مختلف ہوتا ہے، اور تجربہ کاروں کی آپریٹنگ عادات کا نیوکلک ایسڈ کی سالمیت پر زیادہ اثر پڑے گا، اور اگر ضروری ہو تو کم درجہ حرارت پر آپریشن کی ضرورت ہوتی ہے۔
لہذا، پیسنے کی مالا دولن کو موجودہ سادہ اور موثر پیسنے کا سامان سمجھا جا سکتا ہے۔
عام دولن کے طریقوں میں عمودی دولن، افقی دو طرفہ دولن اور تین جہتی (افقی دولن) شامل ہیں۔تاہم، فارجین کا ٹشو کولہو موجودہ ماڈل کو توڑتا ہے اور پیسنے کو مزید یکساں بنانے کے لیے ایک نیا 4D دوغلی طریقہ اپناتا ہے۔
کام کرنے کے لئے آسان، مختلف نمونے کی ضروریات کو پورا کریں
منفرد 4D کرشنگ ٹیکنالوجی، کرشنگ کی کارکردگی میں 20 فیصد اضافہ ہوا ہے
نمونہ مکمل طور پر بند ہے، کوئی کراس آلودگی نہیں
خاموش، ≤56 ڈیسیبل
تجربے کے نتائج کا موازنہ لہر سے کریں۔
ٹیسٹ کا نمونہ: 50 ملی گرام گندم کے پتے (پولی سیکرائڈز اور پولیفینول کی کم مقدار)
نیوکلک ایسڈ کی قسم نکالیں: آر این اے
جگہ کی مقدار: 5μl
استعمال شدہ نکالنے والی کٹ ہے فارجین پلانٹ ٹوٹل آر این اے ایکسٹریکشن کٹ (RE-05011)
ڈیٹا اور الیکٹروفورسس گراف کا موازنہ کرتے ہوئے، یہ دیکھا جا سکتا ہے کہ مشین پیسنے کے بعد نکالے گئے آر این اے کا ارتکاز اور پاکیزگی مائع نائٹروجن پیسنے سے زیادہ ہے۔ایک ہی وقت میں، کیونکہ مشین پیسنے سے نمونے کو مکمل طور پر توڑ سکتا ہے، چھوٹے RNA کو بہتر طریقے سے نکالا جا سکتا ہے اور RNA کی سالمیت کو برقرار رکھا جا سکتا ہے۔
ٹیسٹ کا نمونہ: 50 ملی گرام جِنکگو کے پتے (زیادہ پولی سیکرائیڈ اور پولی فینول مواد)
نیوکلک ایسڈ کی قسم نکالیں: آر این اے
جگہ کی مقدار: 5μl
Foregene Polysaccharide Polyphenol Plant Total RNA ایکسٹریکشن کٹ (RE-05021) کا استعمال
پولی سیکرائڈز اور پولیفینول کے اعلی مواد کے ساتھ نمونوں کے اس گروپ پر ایک نظر ڈالیں۔اس کا اثر اور بھی واضح ہے۔اسی پاکیزگی کے ساتھ، مشین سے پیسنے والے RNA کا ارتکاز مائع نائٹروجن پیسنے سے تقریباً 5 گنا ہے، اور چھوٹا RNA اب بھی دھندلا پن سے نظر آتا ہے~
اگر آپ محسوس کرتے ہیں کہ مندرجہ بالا آلات میں سے کوئی بھی کافی تیز نہیں ہے، تو ایڈیٹر کو حتمی آلات کے ساتھ آنا ہوگا!
پلانٹ ڈائریکٹ پی سی آر سیریز
اس آلات کی انوکھی خصوصیت یہ ہے کہ پودوں کے پتوں یا بیجوں کو گرانے اور ٹوٹنے کی ضرورت نہیں ہے، اور lysis کے لیے براہ راست EP ٹیوب میں پھینک دیے جاتے ہیں، اور نتیجے میں lysis کے مرکب کو PCR کے رد عمل کے لیے ٹیمپلیٹ کے طور پر استعمال کیا جا سکتا ہے۔یہ اتنا ہی آسان ہے جتنا ایک قدم تیز!اس کے ساتھ ہی، فورجین پلانٹس کی براہ راست پی سی آر سیریز UNG انسداد آلودگی کے نظام سے لیس ہے، تاکہ تجربہ کاروں کو لیبارٹری میں ایروسول کی آلودگی کے بارے میں مزید فکر نہ ہو اور وہ تجربہ آسانی سے کر سکیں۔
فیصلے کی تجاویز:
یہ فیصلہ کیسے کریں کہ آیا یہ پولی سیکرائیڈ پولیفینول پلانٹ ہے۔
تقریباً 20mg ٹشو بلاک لیں اور اسے صاف 1.5ml سینٹری فیوج ٹیوب میں ڈالیں، 200ul 200mM NaOH محلول ڈالیں، اسے 10 منٹ کے لیے 95℃ پر رکھیں، lysis کے بعد رنگ کی تبدیلی کا مشاہدہ کریں۔
1. اگر لیسیٹ کا رنگ سبز یا ہلکا پیلا ہے، تو اس کا مطلب ہے کہ ٹشو پولی فینول کا مواد کم ہے، اور اسے فورجین پلانٹ سیریز استعمال کرنے کی سفارش کی جاتی ہے۔
2. اگر لیسیٹ بھورا پیلا یا بھورا سرخ رنگ کا ہے، تو اس کا مطلب ہے کہ ٹشو پولی فینول کی مقدار زیادہ ہے، اور اسے Foregene Polysaccharide Polyphenol Plant Plus سیریز استعمال کرنے کی سفارش کی جاتی ہے۔
پوسٹ ٹائم: اگست-20-2021
