نیوکلک ایسڈ ٹیسٹنگ لیبارٹریوں میں پی سی آر کے طریقے اور نیوکلیک ایسڈ ایروسول آلودگی ایک سکے کے دو رخ ہیں۔ہم صرف اس کا انتخاب کر سکتے ہیں یا نہیں، لیکن ہم یہ انتخاب نہیں کر سکتے کہ ہم اسے چاہتے ہیں یا خرچ کرتے ہیں۔

1. ڈی این اے ہٹانے والے کی اسکریننگ

نیوکلک ایسڈ ایروسول آلودگی کے مقامی ہٹانے کو حاصل کرنے کے لیے، سب سے پہلے ضروری ہے کہ ڈی این اے ہٹانے والوں کی اسکریننگ کی جائے جو مائع حالت میں نیوکلک ایسڈ کو ہٹا سکتے ہیں۔کیونکہ بہت سے ڈی این اے ہٹانے والے نہیں ہیں جو واقعی کام کرتے ہیں۔تجرباتی طریقہ کے لیے ملاحظہ کیجیے: ڈی این اے ریموور لیبارٹری کا "خفیہ گوشہ" نہیں ہو سکتا!

اس تجربے میں، ASFV پلازمیڈ اور ڈی این اے ریموور کی 100 کاپیاں/μL (CT تقریباً 31) کو ڈیجیٹل پی سی آر کے ذریعہ مقدار میں ملایا گیا، اور پھر کمرے کے درجہ حرارت پر بالترتیب 10 منٹ، 20 منٹ اور 30 ​​منٹ تک رد عمل ظاہر کیا۔نیوکلک ایسڈ نکالنے کے بعد، کیو پی سی آر پروردن انجام دیا گیا۔پلازمیڈ اور پانی کے ساتھ ملا ہوا ایک مثبت کنٹرول کا موازنہ کیا گیا۔چونکہ تجربہ ایک ہی وقت میں مکمل نہیں ہوا تھا، اس لیے نتائج کے درمیان ایک خاص انحراف ہو سکتا ہے، لیکن یہ تجربے کے اختتام کو متاثر نہیں کرتا ہے۔اب تک، میں نے 10 کمرشل ڈی این اے ہٹانے والی مصنوعات کا جائزہ لیا ہے۔صرف نمبر 1، نمبر 6 اور نمبر 8 مصنوعات ہی مائع حالت میں پلاسمڈ ڈی این اے کو مؤثر طریقے سے کم کر سکتی ہیں۔دیگر مصنوعات تقریبا کوئی اثر نہیں ہے.

جدول 1 تجارتی طور پر دستیاب ڈی این اے ریموور کا نیوکلک ایسڈ ہٹانے کا اثر

2. عام طور پر استعمال ہونے والے جراثیم کشوں کا DNA ہٹانے کے اثر کا تجربہ

1. عام طور پر استعمال ہونے والے جراثیم کش ادویات کی اسکریننگ

لیبارٹریوں میں عام طور پر استعمال ہونے والے جراثیم کش ادویات کی بہت سی اقسام ہیں: الڈیہائیڈز، فینولز، الکوحل، کواٹرنری امونیم نمکیات، پیرو آکسائیڈز، کلورین کی تیاری، اور تیزاب اور بیس۔مائکروجنزموں پر ان جراثیم کشوں کے جراثیم کش اثرات کی مکمل طور پر تجربات سے تصدیق ہو چکی ہے، لیکن نیوکلک ایسڈز کے انحطاط کے اثر کے بارے میں کوئی خاطر خواہ تجرباتی ڈیٹا موجود نہیں ہے۔نیوکلک ایسڈ ٹیسٹنگ لیبارٹریوں کو ایک جراثیم کش کی ضرورت ہوتی ہے جو نہ صرف مائکروجنزموں پر اچھا جراثیم کش اثر رکھتا ہو بلکہ ڈی این اے کو بھی خراب کر سکتا ہے۔ٹیسٹ کے نتائج سے پتہ چلتا ہے کہ 84 جراثیم کش اور trichloroisocyanuric ایسڈ اور 1 M ہائیڈروکلورک ایسڈ کی صرف دو کلورین تیاریاں ضروریات کو پورا کرتی ہیں۔چونکہ 1M ہائیڈروکلورک ایسڈ انتہائی سنکنرن ہے، اس لیے تجویز کی جاتی ہے کہ کلورین کی تیاریوں کو نیوکلک ایسڈ ٹیسٹنگ لیبارٹریوں میں فضلے کو ٹھکانے لگانے کے طور پر استعمال کیا جائے۔تاہم، کلورین کی تیاریاں دھاتوں کے لیے سنکنار ہوتی ہیں اور آلات اور آلات کی جراثیم کشی کے لیے استعمال نہیں کی جا سکتیں۔

جدول 2 مختلف قسم کے جراثیم کش ادویات کے ڈی این اے کو ہٹانے کے اثرات

2. کلورین کی تیاریوں کی کم از کم مؤثر ارتکاز

کلورین پر مبنی جراثیم کش مادوں کا مضبوط ڈی این اے انحطاط کا اثر ہوتا ہے، لیکن ان کی دھاتی سنکنرن اور جلن کی وجہ سے، ان کا استعمال فرش، غیر دھاتی کاؤنٹر ٹاپس، بھیگنے والی ٹپس، سینٹری فیوج ٹیوبوں اور دیگر ٹیسٹ آئٹمز کو صاف کرنے کے لیے کیا جا سکتا ہے۔

"نئے کورونری نیومونیا ایپیڈیمک ڈس انفیکشن ٹیکنیکل گائیڈلائنز" کے مطابق: آلودگی (مریضوں کا خون، رطوبت اور قے) دستیاب کلورین 5g/L-10g/L کلورین پر مشتمل جراثیم کش؛فرش، دیواریں اور آبجیکٹ کی سطح دستیاب کلورین 1g/L کلورین جراثیم کش استعمال کرتی ہے: کپڑے، بستر اور دیگر ٹیکسٹائل کو پہلے 0.5g/L دستیاب کلورین کے ساتھ کلورین جراثیم کش میں 30 منٹ تک بھگو دیا جاتا ہے، اور پھر معمول کے مطابق صاف کیا جاتا ہے۔

ٹیبل 3 کلورین جراثیم کش کے مختلف ارتکاز کا DNA ہٹانے کا اثر

ٹیسٹ کے نتائج سے پتہ چلتا ہے کہ: جب مؤثر کلورین کا ارتکاز 1.2 g/L سے زیادہ یا اس کے برابر ہوتا ہے، تو کلورین پر مشتمل جراثیم کش دوا 5 منٹ تک استعمال ہونے پر 100 کاپیاں/μL پلازمیڈ کو مکمل طور پر کم کر سکتا ہے۔10 منٹ تک کام کرنے پر، 0.6 g/L سے زیادہ یا اس کے برابر کلورین کی مؤثر ارتکاز کے ساتھ 84 جراثیم کش ادویات پلازمیڈ کی 100 کاپیاں/μL کو مکمل طور پر کم کر سکتی ہیں۔

3. نیوکلک ایسڈ ایروسول سے آلودہ ہوا کو ہٹانے کا تجربہ

نیوکلک ایسڈ ایروسول سے آلودہ ہوا کو کیسے صاف کیا جائے؟زیادہ تر خیالات ایروسول سے آلودہ ماحول پیدا کرنے اور پھر اسے صاف کرنے، یا آلودگی کے بعد نیوکلک ایسڈ کو صاف کرنے کے ہیں۔میرے لیے ایک ایسا تجربہ جسے دہرایا نہیں جا سکتا اور تجربے کے نتائج کا مقداری تجزیہ نہیں کیا جا سکتا، بے معنی ہے، اس لیے میں نے جراثیم کش ہوا کے جراثیم کشی کے کچھ طریقے ادھار لیے۔"جی بی 27948-2020 ہوائی جراثیم کش ادویات کے عمومی تقاضے" اور "جراثیم کشی تکنیکی تفصیلات" دیکھیں۔

1. ٹیسٹ مواد

1.1 ڈی این اے ہٹانے والا: اس تجربے میں، ٹیبل 1 میں دو تجارتی طور پر دستیاب ڈی این اے ہٹانے والے 6 اور 8 کا انتخاب کیا گیا۔

1.2 ٹیسٹ پلاسمڈ: اس بات پر غور کرتے ہوئے کہ زیادہ تر لیبارٹری آلودگی کی CT قدر 30 سے ​​زیادہ ہوگی، اس بار استعمال ہونے والے ASFV جین پلاسمڈ کا ارتکاز تقریباً 100 کاپیاں/μL ہے، اور فلوروسینٹ مقداری PCR CT تقریباً 31.07 ہے۔پلاسمڈ کو روئی کے جھاڑو میں شامل کریں اور ہوا خشک کریں۔

1.3 ٹیسٹ کا آلہ: Bilingkehan KVBOX ڈس انفیکشن کا آلہ، جسے شینزین رنلین انوائرمینٹل ٹیکنالوجی کمپنی، لمیٹڈ کی طرف سے تعاون کیا جاتا ہے، ہائیڈروجن پیرو آکسائیڈ جراثیم کش کے ساتھ بہترین ہوا سے جراثیم کشی کی کارکردگی رکھتا ہے، اور مؤثر طریقے سے بیضوں اور دیگر مائکروجنزموں کو مار سکتا ہے۔

1.4 ٹیسٹ کی جگہ: تقریباً 0.1 کیوبک میٹر کی ایک بند ٹرانسفر ونڈو۔

2. ٹیسٹ کا طریقہ

جراثیم کشی کرنے والی مشین پر جراثیم کش کی مقدار 10 ملی لیٹر ہے، اور ارتکاز 100 ملی لیٹر/ ایم 3 ہے، جو کہ "جی بی 27948-2020 ہوائی جراثیم کش کے عمومی تقاضوں" سے کہیں زیادہ ہے: ایروسول سپرے ڈس انفیکشن کا استعمال کرتے وقت، جراثیم کش کی مقدار ≤10 ملی لیٹر/m3 ہونی چاہیے۔