تعارف:

آر این اے مالیکیول دوسرے حیاتیاتی مالیکیولز جیسے کہ پروٹین، ڈی این اے اور آر این اے کے ساتھ بڑے پیمانے پر تعامل کر سکتے ہیں اور اس طرح میکرو مالیکیولر کمپلیکس کی شکل میں خلیوں اور جانداروں میں موجود ہوتے ہیں۔ان میں سے، آر این اے-پروٹین کمپلیکس آر این اے کی اہم شکلوں میں سے ایک کا وجود اور کام ہیں۔RNA پل ڈاون RNA مالیکیولز، خاص طور پر lncRNA مالیکیولز کے انٹرایکٹنگ پروٹینز کی اسکریننگ اور شناخت کے لیے ایک کلاسک طریقہ ہے، اور اسے زیادہ تر محققین اور بین الاقوامی مستند علمی جرائد نے تسلیم کیا ہے۔آج FORREGENE آپ کے ساتھ RNA پل ڈاؤن کے تجرباتی اصول اور تکنیکی عمل کا اشتراک کرے گا، شاید آپ اسے استعمال کر سکیں۔

1. آر این اے پل ڈاؤن ٹیکنالوجی کا تجرباتی اصول:

بایوٹین کے لیبل والے ٹارگٹ lncRNA یا lncRNA کے ٹکڑوں کی وٹرو ٹرانسکرپشن اور ترکیب (بشمول مثبت اور منفی کنٹرول کے طور پر استعمال ہونے والے RNA کے ٹکڑے)، اور سیل کے نچوڑ کے ساتھ انکیوبیٹ؛آر این اے-پروٹین یا آر این اے-آر این اے کمپلیکس کو جمع کرنے کے لیے ایوڈین اینکرڈ مقناطیسی موتیوں کا استعمال کریں، اچھی طرح دھونے کے بعد، کمپلیکس ایلوٹ ہو جاتا ہے۔اگر پروٹین ٹارگٹ مالیکیول کا پتہ لگانا جو lncRNA کے ساتھ تعامل کرتا ہے، RNA-pul down پراڈکٹ پر پروٹین الیکٹروفورسس انجام دیں، سلور سٹیننگ کے ذریعے ٹارگٹ پروٹین کا پتہ لگائیں، اور ماس اسپیکٹومیٹری کے لیے جیل کو کاٹیں۔پل ڈاؤن پروڈکٹ پر براہ راست مغربی دھبے کی تصدیق بھی کرتا ہے۔اگر RNA ٹارگٹ مالیکیولز کا پتہ چلا جو lncRNA کے ساتھ تعامل کرتے ہیں، RNA-pul down مصنوعات کو RNA نکالنے کا نشانہ بنایا جاتا ہے اور مخصوص qRT-PCR کا پتہ لگایا جاتا ہے۔

2. آر این اے پل ڈاؤن ٹیکنالوجی کے تجرباتی عمل:

.

سیل کلچر

سیل کل/جوہری/پلازما پروٹین کے عرق کی تیاری

آر این اے پل ڈاون تجربہ

SDS-PAGE الیکٹروفورسس، چاندی کا داغ

ماس سپیکٹومیٹری اور ڈبلیو بی کے تجربات

تجرباتی رپورٹ

4. تجرباتی کیس

مندرجہ ذیل اعداد و شمار FJ Bio-Bio کے RNA پل ڈاؤن اور SDS-PAGE الیکٹروفورسس کا پتہ لگانے کے نتائج دکھاتا ہے، جس میں سرخ تیر فرق بینڈ کو نشان زد کرتا ہے:

سیچوان یونیورسٹی کے پروفیسر سونگ سو کے ریسرچ گروپ نے lncRNA تحقیق کے میدان میں 15 سال کی طویل مدتی جمع کی ہے۔Foregene Bio اور پروفیسر Song Xu کے ریسرچ گروپ نے lncRNA کی RNA پل ڈاؤن ٹیکنالوجی کو شروع کرنے میں تعاون کیا، جو آپ کو آپ کے تجربے کا تسلی بخش نتیجہ دے گا۔