بلڈنگ ایس او پی سسٹم

تجربہ کار اہلکاروں کے رویے کو معیاری بنانے کے لیے PCR تجرباتی SOP قائم کریں۔

تجربہ کار آپریٹنگ طریقہ کار کی سختی سے پابندی کرتے ہیں، اور PCR آلودگی کو کم سے کم کرتے ہیں جو انسانی عوامل کی وجہ سے ہو سکتا ہے یا آپریشن میں آلودگی کی موجودگی کو روکتا ہے۔اس کے علاوہ، تجربہ کار کے پاس متعلقہ پیشہ ورانہ علم اور مہارتیں ہونی چاہئیں، بشمول متعلقہ آلات کو چلانے میں مہارت، کام کے پورے عمل کو واضح کرنا، آلودگی کے علاج کے طریقوں اور لیبارٹری کوالٹی کنٹرول کے طریقوں میں مہارت حاصل کرنا، اور ٹیسٹ کے نتائج کی صحیح تشریح کرنے کے قابل ہونا۔

معیاری پی سی آر لیبارٹری کی تعمیر

پی سی آر لیبارٹری کو اصولی طور پر چار شعبوں میں تقسیم کیا گیا ہے، یعنی ریجنٹ کی تیاری کا علاقہ، نمونہ پروسیسنگ ایریا، ایمپلیفیکیشن ایریا، اور ایمپلیفیکیشن پروڈکٹ تجزیہ کا علاقہ۔پہلے دو علاقے پری ایمپلیفیکیشن کے علاقے ہیں، اور آخری دو علاقے پوسٹ ایمپلیفیکیشن کے علاقے ہیں۔پری ایمپلیفیکیشن زون اور پوسٹ ایمپلیفیکیشن زون کو سختی سے الگ کیا جانا چاہئے۔تجرباتی مواد، ری ایجنٹس، ریکارڈنگ کا کاغذ، قلم، صفائی کا مواد وغیرہ صرف پری ایمپلیفیکیشن ایریا سے پوسٹ ایمپلیفیکیشن ایریا میں بہہ سکتے ہیں، یعنی ریجنٹ کی تیاری کے علاقے، نمونہ پروسیسنگ ایریا، ایمپلیفیکیشن ایریا، اور ایمپلیفیکیشن پروڈکٹ کے تجزیہ کے علاقے سے، اور ان کا بہاؤ الٹی سمت میں نہیں ہونا چاہیے۔لیبارٹری میں ہوا کا بہاؤ بھی پری ایمپلیفیکیشن ایریا سے پوسٹ ایمپلیفیکیشن ایریا کی طرف بہنا چاہیے، الٹی سمت میں نہیں۔

تجرباتی مراحل کو کم کریں۔

اگر لیبارٹری صرف پی سی آر کا پتہ لگانے اور شناخت کرتی ہے تو، روایتی پی سی آر کے بجائے فلوروسینٹ مقداری پی سی آر استعمال کرنے کی سفارش کی جاتی ہے۔

فلوروسینٹ مقداری PCR کا پتہ لگانے کے نتائج فلوروسینٹ سگنلز کے ذریعے جمع اور تجزیہ کیے جا سکتے ہیں، اس لیے رد عمل کے بعد الیکٹروفورسس کے لیے ڈھکن کھولنے کی ضرورت نہیں ہے، جس سے پی سی آر مصنوعات کی آلودگی سے بچا جا سکتا ہے جو کہ ایروسول بنانے کے لیے رد عمل کی مصنوعات کے رساو کی وجہ سے ہوتی ہے۔اگر آپ جیل الیکٹروفورسس کے لوڈنگ مرحلے کے دوران ٹوپی کھولنے کی تعداد میں اضافہ کرتے ہیں تو، ایروسول آلودگی ہونے کا امکان ہے۔یہ سفارش کی جاتی ہے کہ مقداری پی سی آر کے اطلاق کو فروغ دیا جائے اور آہستہ آہستہ کوالٹیٹیو پی سی آر کو تبدیل کیا جائے۔

UNG انسداد آلودگی کے نظام کو اپنائیں

UNG اینٹی پی سی آر مصنوعات کی آلودگی کا نظام پی سی آر کے رد عمل کے لیے استعمال کیا جاتا ہے۔

سسٹم ڈی ٹی ٹی پی کی بجائے ڈی یو ٹی پی استعمال کرتا ہے۔پی سی آر کے رد عمل کے بعد، تمام پی سی آر پروڈکٹس (ڈی این اے کے ٹکڑے) ڈی یو ٹی پی کے ساتھ شامل کیے جاتے ہیں۔پی سی آر ری ایکشن کے اگلے دور میں، سسٹم میں شامل یو این جی انزائم کو پی سی آر سے پہلے 5 منٹ کے لیے 37 ڈگری سینٹی گریڈ پر انکیوبیٹ کیا جاتا ہے، جو ڈی یو ٹی پی پر مشتمل تمام ڈی این اے کے ٹکڑوں کو ڈیگریڈ کر سکتا ہے، اور پھر پی سی آر ری ایکشن کر سکتا ہے۔یہ پی سی آر مصنوعات کی وجہ سے ایروسول آلودگی کو مکمل طور پر دور کر سکتا ہے۔اثر نیچے دی گئی تصویر میں دکھایا گیا ہے۔

نوٹ: براہ راست پی سی آر سیریز کے لیے، آپ ایف جے بائیوٹیک کے اینٹی پی سی آر پروڈکٹ آلودگی نظام کی سیریز کی مصنوعات کا انتخاب کر سکتے ہیں۔

تجویز کریں۔

بڑے پیمانے پر جین ٹائپنگ ٹیسٹنگ کرنے والی لیبارٹریوں کے لیے، معقول لیبارٹریوں کی تعمیر کے علاوہ ری ایجنٹس کی جانچ کے لیے UNG اینٹی پی سی آر پروڈکٹ آلودگی کے نظام کو استعمال کرنے کی سختی سے سفارش کی جاتی ہے۔

یاد دہانی: اس سسٹم کا استعمال پی سی آر پروڈکٹ کی آلودگی کو دور نہیں کر سکتا جو پہلے ہی پیدا ہو چکی ہے۔لہذا، UNG سسٹم کو متعلقہ ٹیسٹ کے آغاز میں استعمال کیا جانا چاہیے، اور UNG سسٹم کو ہمیشہ PCR ایمپلیفیکیشن کے لیے استعمال کیا جانا چاہیے، تاکہ PCR مصنوعات کی آلودگی کو روکا جا سکے۔غلط مثبت۔

بڑے پیمانے پر ٹیسٹنگ کرتے وقت فورج بائیوٹیک کے ڈائریکٹ PCR-UNG سسٹم کو استعمال کرنے کی سفارش کی جاتی ہے، جیسے: پلانٹ لیف ڈائریکٹ PCR Kit-UNG；

پلانٹ سیڈ ڈائریکٹ پی سی آر کٹ-یو این جی؛

جانوروں کے ٹشو ڈائریکٹ پی سی آر کٹ-یو این جی؛

ماؤس ٹیل ڈائریکٹ پی سی آر کٹ-یو این جی؛

زیبرا فش ڈائریکٹ پی سی آر کٹ-یو این جی۔

Foregene سے کٹس کا یہ سلسلہ نہ صرف پی سی آر کا پتہ لگانے کو تیزی سے اور بڑے پیمانے پر انجام دے سکتا ہے بلکہ پی سی آر مصنوعات کی آلودگی کو مؤثر طریقے سے روک اور کنٹرول بھی کر سکتا ہے۔