• فیس بک
  • لنکڈ
  • یوٹیوب

1: تجرباتی سامان کو وقت پر تبدیل کریں۔

news812 (1) 

(NTC) منفی کنٹرول قائم کریں اور اسے کئی بار دہرائیں۔ایک بار جب یہ پتہ چل جائے کہ لیبارٹری میں پی سی آر مصنوعات کی آلودگی ہے، تمام تجرباتی سامان کو وقت پر تبدیل کریں۔جیسے: پرائمر کو دوبارہ پتلا کریں اور تیار کریں، پپیٹ کی نوک کو دوبارہ جراثیم سے پاک کریں، EP ٹیوب، ddH2O، وغیرہ، نئے پائپیٹ سے بدلیں، اور PCR تجربات کرنے کے لیے عارضی طور پر دیگر لیبارٹریز سے قرض لیں۔آلودہ لیبارٹری کو ہوادار اور الٹرا وائلٹ شعاعوں سے شعاع کیا جائے گا جب تک کہ تجربہ کو آگے بڑھانے سے پہلے PCR مصنوعات کی آلودگی ختم نہ ہوجائے۔

2: UV کی نمائش کا وقت بڑھائیں۔

news812 (2)

یہ بات قابل غور ہے کہ ڈی این اے کی آلودگی کو دور کرنے کے لیے باقاعدہ الٹرا وائلٹ شعاعوں کو معمول سے 2 گھنٹے بڑھایا جانا چاہیے۔اس کے باوجود، DNA آلودگی کے چھوٹے ٹکڑوں (200bp سے نیچے) کو ہٹانے پر UV شعاع ریزی کا اثر اب بھی اچھا نہیں ہے۔

بالائے بنفشی طول موج (nm) عام طور پر 254/300nm ہے، اور یہ 30 منٹ تک شعاع ریزی کرنے کے لیے کافی ہے۔واضح رہے کہ بقایا PCR مصنوعات کی آلودگی کو ختم کرنے کے لیے UV کا انتخاب کرتے وقت، PCR پروڈکٹ کی لمبائی اور پروڈکٹ کی ترتیب میں بنیادوں کی تقسیم پر غور کیا جانا چاہیے۔UV شعاع ریزی صرف 500 bp سے اوپر کے لمبے ٹکڑوں کے لیے موثر ہے، اور چھوٹے ٹکڑوں پر بہت کم اثر ڈالتی ہے۔

UV شعاع ریزی کے دوران، پی سی آر پروڈکٹ میں پائریمیڈائن بیسز ڈائمر بنائیں گے۔یہ ڈائمرز ایکسٹینشن کو ختم کر سکتے ہیں، لیکن ڈی این اے چین میں موجود تمام پیریمائڈائنز ڈائمر نہیں بنا سکتے، اور یووی شعاع ریزی بھی ڈائمرز کو توڑ سکتی ہے۔.ڈائمر کی تشکیل کی ڈگری کا انحصار UV طول موج، pyrimidine dimer کی قسم اور dimer سائٹ سے متصل نیوکلیوٹائڈس کی ترتیب پر ہوتا ہے۔لہذا، اگر پی سی آر ایمپلیفائیڈ ٹکڑے چھوٹے ہیں، تو یہ UNG اینٹی پی سی آر مصنوعات کی آلودگی کے نظام کو استعمال کرنے کی سفارش کی جاتی ہے۔

3: عام طور پر استعمال ہونے والے ڈی این اے آلودگی کو صاف کرنے والے

news812 (3)

جب پائپیٹ شامل کیے جاتے ہیں تو ایروسول آسانی سے پیدا ہوتے ہیں، جس سے بچنا مشکل ہوتا ہے، اور یہ جلد ٹھیک ہو جائے گا۔لہذا، بلاشبہ ڈی این اے آلودگی کے پھیلاؤ کو روکنے کے لیے خصوصی ڈی این اے آلودگی کی صفائی کرنے والوں کا کثرت سے استعمال کرنا ایک اچھا انتخاب ہے۔

4: UNG انسداد آلودگی کا نظام استعمال کریں۔

news812 (4)

PCR مصنوعات کی آلودگی کو ہٹانے کے بعد، ٹیسٹنگ لیبارٹری PCR مصنوعات کی آلودگی کو روکنے کے لیے UNG اینٹی PCR مصنوعات کی آلودگی کے نظام کا استعمال کر سکتی ہے۔عام لیبارٹریوں میں، آپ سادہ تجرباتی پارٹیشنز انجام دے سکتے ہیں، PCR پروڈکٹ کے علاقے کو دوسرے علاقوں سے سختی سے الگ کر سکتے ہیں، لیبارٹری کے کچھ اصول و ضوابط قائم کر سکتے ہیں، اور PCR پروڈکٹ کی آلودگی کو روکنے کے لیے متعلقہ تربیت کر سکتے ہیں۔

سفارشات: ایک معقول پی سی آر لیبارٹری کا قیام، پی سی آر کے اچھے ماحول کو برقرار رکھنا، معیاری پی سی آر آپریٹنگ طریقہ کار وضع کرنا، اور تجربہ کاروں کی سخت آپریٹنگ بیداری پیدا کرنا پی سی آر تجربات کی آلودگی کو روکنے یا کم کرنے کی کلیدیں ہیں۔


پوسٹ ٹائم: اگست 12-2021