• فیس بک
  • لنکڈ
  • یوٹیوب

news716 (1)

کیا آپ اب بھی RNA نکالنے کے لیے Trizol استعمال کر رہے ہیں؟
گوش، مجھے اپنی صحت کی فکر نہ ہونے دیں!
Trizol پسماندہ ہونے کو ہے، مجھے مت بتاؤ کہ تم ابھی تک اندھیرے میں ہو؟

Trizol reagent کا بنیادی جزو فینول ہے، اور تجرباتی آپریشن میں کلوروفارم جیسے نامیاتی ریجنٹس کو بھی شامل کیا جاتا ہے۔طویل مدتی نمائش آپ کی صحت کو نقصان پہنچا سکتی ہے، خاص طور پر جلد سے براہ راست رابطہ شدید کیمیائی جلنے اور مستقل نشانات کا سبب بن سکتا ہے۔

عام حالات میں، لیبارٹری کے شراکت دار اپنے آپ کو مکمل طور پر مسلح کر کے ہی خطرات کو کم کر سکتے ہیں (لیب کوٹ، دستانے اور ماسک پہن کر)۔

اور میرا آپ کو مشورہ ہے: براہ کرم ٹرائیزول کو براہ راست تبدیل کریں تاکہ ذریعہ سے نقصان نہ ہو۔

1. آر این اے نکالنے کی پہلی نسل کی مصنوعات
1987 میں باہر آئیں (Trizol reagents)

فائدہ:
مزید مکمل نکالنا

نقصانات:
زہریلے ریجنٹس جیسے گوانیڈائن آئسوتھیوسائنیٹ-فینول-کلوروفارم کی ضرورت ہے۔

بوجھل آپریشن؛
ڈی این اے کی آلودگی کو دور کرنے کے لیے DNase استعمال کرنے کی ضرورت ہے۔

2. آر این اے نکالنے کی دوسری نسل کی مصنوعات
1994 میں سامنے آئیں (QIAGEN RNeasy اور زیادہ تر گھریلو مصنوعات)

فائدہ:
کالم سینٹرفیوگل طریقہ اپنایا جاتا ہے، جو کام کرنا آسان ہے؛

نقصان:
ٹشو کے ملبے کو ہٹانے کے لیے سینٹرفیوج کی ضرورت ہے۔

ڈی این اے کی آلودگی کو دور کرنے کے لیے DNase استعمال کرنے کی ضرورت ہے۔

3.آر این اے نکالنے کی تیسری نسل کی مصنوعات
2005 میں منظر عام پر آرہا ہے (QIAGEN RNeasy Plus اور Fاوریجینآر این اے پیوریفیکیشن سیریز کی مصنوعات)

فائدہ:
ایک ہی وقت میں ڈی این اے اور بافتوں کے ملبے کو ہٹانے کے لیے براہ راست DNA ہٹانے والے کالم کا استعمال کریں، وقت اور محنت کی بچت؛

محفوظ اور آسان، آسانی سے نجاست کو دور کرنے اور ڈی این اے کی آلودگی سے بچنے کے لیے فلٹر کالم اور DNase شامل کرنے کی ضرورت نہیں

news716 (2)

آئیے پہلی نسل کی مصنوعات (Trizol)، دوسری نسل کی مصنوعات (RNeasy) اور RNA نکالنے کی تیسری نسل کی مصنوعات (Foregene) کے درمیان آپریشنل فرق کو دیکھتے ہیں:news716 (3)

اعداد و شمار میں آپریشن واضح ہے: تیسری نسل کی مصنوعات کے واضح فوائد ہیں

بیان کرنے کے لیے صرف تین الفاظ: آسان!تیز!حفاظت

تجرباتی نتائج کا PK چارٹکے لیےRNA نکالنے کی پہلی نسل، دوسری نسل اور تیسری نسل کی مصنوعات:

1. Eلیکٹروفوریٹوگرام

پہلی نسل (1: Trizol)
دوسری نسل (2: کیجین RNeasy)
تیسری نسل (3: کیجین RNeasy plus, 4: Foregene)

news716 (4)

کس قسم کی پروڈکٹ اچھی ہے، آپ کو موازنہ سے معلوم ہو جائے گا۔
فارجین کٹ کا استعمال کرتے ہوئے آر این اے نکالا گیا۔
نہ صرف اعلی حراستی بلکہ اچھی سالمیت بھی

2.qPCR گراف (ایمپلیفیکیشن کریو گراف)

news716 (5)
پہلی نسل (Trizol)

news716 (6)

دوسری نسل (اسکائی بلیومطلبQIAGEN RNeasy-، سرخمطلبQIAGEN RNeasy +)

news716 (7)

تیسری نسل (نیلے کا مطلب فارجین، سبز کا مطلب ہے QIAGEN RNeasy plus)

(نوٹ: qPCR گراف کی دوسری نسل کی QIAGEN RNeasy کا مطلب ہے کہ کٹ DNase کو شامل نہیں کرتی ہے اور DNA کی آلودگی کو دور نہیں کرتی ہے۔ لہذا، CT زیادہ ہے اور نتیجہ درست نہیں ہے؛ QIAGEN RNeasy + کا مطلب ہے کہ DNase کو شامل کیا گیا ہے اور DNA آلودگی کو ہٹا دیا گیا ہے، اور نتیجہ درست ہے)

چاہے یہ الیکٹروفورٹوگرام ہو یا مقداری PCR ایمپلیفیکیشن کریو گراف، فارجین مصنوعات کا معیار غیر ملکی درآمد شدہ مصنوعات سے کمتر نہیں ہے۔


پوسٹ ٹائم: جولائی 16-2021