پھیلنے کے ابتدائی مرحلے میں، تیزی سے ترقی کی وجہ سے، مشتبہ مریضوں کی تیزی سے تشخیص COVID-19 کو روکنے کی کلید ہے۔کچھ منظور شدہ نیوکلک ایسڈ کا پتہ لگانے والے ریجنٹس کی نشوونما کا وقت کم ہوتا ہے، اور جلد بازی کی کارکردگی کی تصدیق، ناکافی ریجنٹ کی اصلاح، اور بیچوں کے درمیان بڑے فرق جیسے مسائل ہیں۔نیوکلک ایسڈ کا پتہ لگانے کے عمل کے مختلف پہلوؤں میں مختلف طبی لیبارٹریوں کے مسائل بھی نیوکلک ایسڈ کا پتہ لگانے کے نتائج کی درستگی کو متاثر کر سکتے ہیں۔یہ مضمون موجودہ SARS-CoV-2 نیوکلک ایسڈ کا پتہ لگانے کے کلیدی روابط اور نکات پر توجہ مرکوز کرے گا، اور لیبارٹری نیوکلک ایسڈ کی کھوج اور طبی عدم مطابقت کے غلط منفی اور مثبت دوبارہ امتحان کے مسائل کا تجزیہ کرے گا۔

SARS-CoV-2 نیوکلک ایسڈ کا پتہ لگانے کے اصول

SARS-CoV-2 ایک RNA وائرس ہے جس کا جینوم تسلسل تقریباً 29 kb ہے، جس میں 10 جین ہیں، جو 10 پروٹین کو مؤثر طریقے سے انکوڈ کر سکتے ہیں۔وائرس آر این اے اور پروٹین پر مشتمل ہوتے ہیں، اور سب سے باہر کی تہہ لپڈز اور گلائکوپروٹینز پر مشتمل ایک بیرونی کوٹنگ ہوتی ہے۔اندر، پروٹین کیپسڈ آر این اے کو اس میں لپیٹ دیتا ہے، اس طرح آسانی سے انحطاط پذیر RNA (P1) کی حفاظت کرتا ہے۔

P1 SARS-COV-2 کا ڈھانچہ

وائرس انفیکشن کا سبب بننے کے لیے مخصوص سیل سطح کے رسیپٹرز کے ذریعے خلیات پر حملہ کرتے ہیں، اور میزبان خلیوں کو نقل کرنے کے لیے استعمال کرتے ہیں۔

وائرل نیوکلک ایسڈ کا پتہ لگانے کا اصول سیل لیسیٹ کے ذریعے وائرل RNA کو بے نقاب کرنا ہے، اور پھر پتہ لگانے کے لیے ریئل ٹائم فلوروسینٹ ریورس ٹرانسکرپشن-پولیمریز چین ری ایکشن (RT-PCR) کا استعمال کرنا ہے۔

پتہ لگانے کے اصول کی کلید نیوکلک ایسڈ کی ترتیب کی "ٹارگٹڈ میچنگ" حاصل کرنے کے لیے پرائمر اور پروبس کا استعمال کرنا ہے، یعنی SARS-CoV-2 کے نیوکلک ایسڈ کی ترتیب کو تلاش کرنا جو تقریباً 30,000 اڈوں میں دوسرے وائرسوں سے مختلف ہے (نیوکلک ایسڈ کی دیگر وائرسوں سے مماثلت)، پرائمر ایریا اور پرائمر ڈیزائن۔

پرائمر اور پروبس SARS-CoV-2 نیوکلک ایسڈ کے مخصوص علاقے کے ساتھ انتہائی مماثل ہیں، یعنی خاصیت بہت مضبوط ہے۔ٹیسٹ کیے جانے والے نمونے کا ریئل ٹائم فلوروسینٹ RT-PCR ایمپلیفیکیشن نتیجہ مثبت آنے کے بعد، یہ ثابت کرتا ہے کہ SARS-CoV-2 نمونے میں موجود ہے۔P2 دیکھیں۔

SARS-CoV-2 نیوکلک ایسڈ کے تعین کے P2 مراحل (ریئل ٹائم فلوروسینٹ RT-PCR)

SARS-CoV-2 نیوکلک ایسڈ کا پتہ لگانے کے لیے لیبارٹری کی شرائط اور ضروریات

نیوکلک ایسڈ ٹیسٹنگ لیبارٹریز منفی دباؤ والے ماحول کے لیے سب سے زیادہ مثالی ہیں، اور انہیں دباؤ کی نگرانی، ہوا کو رواں رکھنے اور ایروسول کو ختم کرنے پر توجہ دینی چاہیے۔نیوکلک ایسڈ کی جانچ کرنے والے اہلکاروں کے پاس متعلقہ قابلیت ہونی چاہیے، متعلقہ پولیمریز چین ری ایکشن ٹریننگ حاصل کریں اور اسسمنٹ پاس کریں۔لیبارٹری کا سختی سے انتظام کیا جائے، جگہ جگہ زون کیا جائے، اور غیر متعلقہ اہلکاروں کو داخلے سے سختی سے منع کیا جائے۔صاف جگہ کو ہوادار اور جگہ جگہ جراثیم کش ہونا چاہیے۔متعلقہ اشیاء کو زون میں رکھا جاتا ہے، صاف اور گندے کو الگ کیا جاتا ہے، وقت پر تبدیل کیا جاتا ہے، اور جگہ جگہ آلودگی سے پاک کیا جاتا ہے۔معمول کی جراثیم کشی: کلورین پر مشتمل جراثیم کش دوا بڑے علاقوں کے لیے بنیادی حل ہے، اور 75% الکحل چھوٹے علاقوں کے لیے استعمال کیا جا سکتا ہے۔ایروسول سے نمٹنے کا ایک اچھا طریقہ وینٹیلیشن کے لیے کھڑکیوں کو کھولنا ہے، اور بالائے بنفشی شعاعوں، فلٹریشن اور ہوا کی جراثیم کشی کے ذریعے ہوا کی جراثیم کشی بھی کی جا سکتی ہے۔

SARS-CoV-2 نیوکلک ایسڈ کے تعین کے کلیدی روابط اور پیرامیٹرز (ریئل ٹائم فلوروسینٹ RT-PCR)

اگرچہ لیبارٹریز عام طور پر نیوکلک ایسڈ "ڈیٹیکشن" پر پوری توجہ دیتی ہیں، درحقیقت، نیوکلک ایسڈ "نکالنا" بھی کامیاب پتہ لگانے کے لیے اہم اقدامات میں سے ایک ہے، جس کا گہرا تعلق وائرس کے نمونوں کو جمع کرنے اور ذخیرہ کرنے سے ہے۔

اس وقت، سب سے زیادہ استعمال ہونے والے سانس کے نمونے، جیسے ناسوفرینجیل سویب، دوسرا طریقہ استعمال کرتے ہیں، جو کہ نیوکلک ایسڈ نکالنے اور لیسز کے حل پر مبنی ایک غیر فعال (محفوظ) حل ہے۔ایک طرف، یہ وائرس پرزرویشن سلوشن وائرس کے پروٹین کو خراب کر سکتا ہے، اپنی سرگرمی کھو سکتا ہے اور اب متعدی نہیں رہ سکتا، اور نقل و حمل اور پتہ لگانے کے مرحلے کی حفاظت کو بہتر بنا سکتا ہے۔دوسری طرف، یہ نیوکلک ایسڈ کو چھوڑنے، نیوکلک ایسڈ کے گلنے والے انزائم کو ختم کرنے اور وائرس کو روکنے کے لیے وائرس کو براہ راست کریک کر سکتا ہے۔آر این اے انحطاط پذیر ہے۔

نیوکلک ایسڈ نکالنے والے لیسس حل کی بنیاد پر تیار کردہ وائرس کے نمونے لینے کا حل۔اہم اجزاء متوازن نمکیات، ethylenediaminetetraacetic acid chelating agent، guanidine salt (guanidine isothiocyanate، guanidine hydrochloride، etc.)، anionic surfactant (dodecane) Sodium sulfate، cationic surfactant (tetradecyl trimethionolyquinite، amphinoloxyline) reitol، proteinase K اور دیگر کئی یا زیادہ اجزاء۔اس وقت، نیوکلک ایسڈ نکالنے کی کٹس کی بہت سی قسمیں ہیں، اور مختلف نیوکلک ایسڈ نکالنے اور صاف کرنے والے ریجنٹس استعمال کیے جاتے ہیں۔یہاں تک کہ اگر ایک ہی نیوکلک ایسڈ نکالنے اور پیوریفیکیشن ری ایجنٹ کا استعمال کیا جائے تو بھی ہر کٹ کے نکالنے کے طریقہ کار مختلف ہیں۔

اس وقت، نیشنل میڈیکل پروڈکٹس ایڈمنسٹریشن کے ذریعہ منظور شدہ نیوکلک ایسڈ کا پتہ لگانے والی کٹ مصنوعات کا انتخاب SARS-CoV-2 جینوم میں ORF1ab، E اور N جینز کی بنیاد پر کیا جاتا ہے۔مختلف مصنوعات کے پتہ لگانے کے اصول بنیادی طور پر ایک جیسے ہوتے ہیں، لیکن ان کے پرائمر اور پروب ڈیزائن مختلف ہوتے ہیں۔واحد ہدف والے حصے (ORF1ab)، دوہری ہدف والے حصے (ORF1ab، N یا E)، اور تین ہدف والے حصے (ORF1ab، N اور E) ہیں۔پتہ لگانے اور تشریح کے درمیان فرق، نیوکلک ایسڈ نکالنے اور ریئل ٹائم فلوروسینٹ RT-PCR ری ایکشن سسٹم کو متعلقہ کٹ ہدایات کا حوالہ دینا چاہیے، اور یہ سفارش کی جاتی ہے کہ صارفین تشریح کے لیے کٹ ہدایات میں بیان کردہ تشریحی طریقہ پر سختی سے عمل کریں۔ریئل ٹائم فلوروسینٹ RT-PCR کے ذریعے وسیع کیے گئے مشترکہ علاقے، پرائمر اور تحقیقاتی سلسلے P3 میں دکھائے گئے ہیں۔

P3 جینوم پر SARS-CoV-2 amplicon ہدف کا مقام اور پرائمر اور تحقیقات کی ترتیب

SARS-CoV-2 نیوکلک ایسڈ کے تعین کے نتائج کی تشریح (Real-Time فلوروسینٹ RT-PCR)

"نمونیا کی روک تھام اور کنٹرول پلان برائے SARS-CoV-2 انفیکشن (دوسرا ایڈیشن)" نے پہلی بار سنگل جین پروردن کے نتائج کو جانچنے کے معیار کو واضح کیا:

1. کوئی Ct یا Ct≥40 منفی نہیں ہے۔

2. Ct <37 مثبت ہے؛

3. 37-40 کی Ct قدر گرے اسکیل ایریا ہے۔یہ تجربہ دہرانے کی سفارش کی جاتی ہے۔اگر Ct<40 کو دوبارہ کرنے کا نتیجہ اور ایمپلیفیکیشن وکر میں واضح چوٹیاں ہیں، تو نمونے کو مثبت سمجھا جاتا ہے، ورنہ یہ منفی ہے۔"

گائیڈ کے تیسرے ایڈیشن اور گائیڈ کے چوتھے ایڈیشن نے مندرجہ بالا معیار کو جاری رکھا۔تاہم، تجارتی کٹس میں استعمال ہونے والے مختلف اہداف کی وجہ سے، گائیڈ کے مذکورہ تیسرے ایڈیشن میں اہداف کے امتزاج کا تعین کرنے کا معیار نہیں دیا گیا، اس بات پر زور دیا گیا کہ مینوفیکچرر کی طرف سے فراہم کردہ ہدایات کو غالب رکھا جائے گا۔رہنما خطوط کے پانچویں ایڈیشن سے شروع کرتے ہوئے، دو اہداف واضح کیے گئے ہیں، خاص طور پر کسی ایک ہدف کے لیے فیصلے کا معیار جس کا فیصلہ کرنا مشکل ہے۔یعنی، اگر لیبارٹری اس بات کی تصدیق کرنا چاہتی ہے کہ SARS-CoV-2 نیوکلک ایسڈ کا پتہ لگانے کے لیے کوئی کیس مثبت ہے، تو درج ذیل کو 2 میں سے 1 شرائط کو پورا کرنے کی ضرورت ہے:

(1) ایک ہی نمونے میں SARS-CoV-2 (ORF1ab, N) کے دو اہداف ریئل ٹائم فلوروسینٹ RT-PCR کے ذریعہ مثبت جانچے گئے ہیں۔اگر ایک ہی ہدف مثبت ہے تو، دوبارہ نمونے لینے اور دوبارہ جانچ کی ضرورت ہے۔اگر ٹیسٹ کے نتائج ہیں اگر واحد ہدف اب بھی مثبت ہے، تو اسے مثبت سمجھا جاتا ہے۔

(2) ریئل ٹائم فلوروسینٹ RT-PCR کے دو نمونوں نے ایک ہی وقت میں ایک ہی ٹارگٹ مثبت دکھایا یا ایک ہی قسم کے دو نمونوں نے ایک ہی ہدف مثبت ٹیسٹ کا نتیجہ دکھایا، جسے مثبت سمجھا جا سکتا ہے۔تاہم، رہنما خطوط اس بات پر بھی زور دیتے ہیں کہ نیوکلک ایسڈ ٹیسٹنگ کے منفی نتائج SARS-CoV-2 انفیکشن کو خارج نہیں کر سکتے۔ایسے عوامل کو خارج کرنے کی ضرورت ہے جو غلط منفی کا سبب بن سکتے ہیں، بشمول نمونے کا خراب معیار (اوروفرینکس اور دیگر حصوں سے سانس کے نمونے)، نمونے کا بہت جلد یا بہت دیر سے جمع کرنا، نمونوں کو محفوظ، نقل و حمل، اور صحیح طریقے سے پروسیس نہیں کیا گیا تھا، اور ٹیکنالوجی میں ہی مسائل تھے (وائرس کی تبدیلی، PCR روکنا) وغیرہ۔

SARS-CoV-2 کا پتہ لگانے میں غلط منفی کی وجوہات

نیوکلک ایسڈ ٹیسٹنگ میں "جھوٹے منفی" کا تصور جس کا فی الحال تعلق ہے، اکثر "غلط منفی" سے مراد ہوتا ہے جس میں نیوکلک ایسڈ ٹیسٹ کے نتائج طبی مظاہر سے مطابقت نہیں رکھتے، یعنی، طبی علامات اور امیجنگ کے نتائج کووڈ-19 کا بہت زیادہ شبہ ہوتا ہے، لیکن نیوکلک ایسڈ ٹیسٹ ہمیشہ "منفی" ہوتے ہیں۔نیشنل ہیلتھ کمیشن کے کلینیکل لیبارٹری سنٹر نے "جھوٹے منفی" SARS-CoV-2 ٹیسٹ کی وضاحت کی۔

(1) متاثرہ شخص کے خلیوں میں وائرس کی ایک خاص مقدار ہوتی ہے۔موجودہ اعداد و شمار سے پتہ چلتا ہے کہ جسم میں وائرس سے متاثر ہونے کے بعد، وائرس ناک اور منہ کے ذریعے حلق میں داخل ہوتا ہے، پھر ٹریچیا اور برونچی تک، اور پھر الیوولی تک پہنچ جاتا ہے۔متاثرہ شخص کو انکیوبیشن کی مدت، ہلکی علامات، اور پھر شدید علامات کے عمل، اور بیماری کے مختلف مراحل کا تجربہ ہوگا۔اور جسم کے مختلف حصوں میں موجود وائرس کی مقدار مختلف ہوتی ہے۔

سیل کی اقسام کے وائرل بوجھ کے لحاظ سے، الیوولر اپیتھیلیل سیل (نچلے سانس کی نالی)> ایئر وے اپیتھیلیل سیل (اوپری سانس کی نالی)> فائبرو بلاسٹس، اینڈوتھیلیل سیل، اور میکروفیجز وغیرہ؛نمونہ کی قسم سے، alveolar lavage سیال (سب سے بہترین)> گہری کھانسی کا تھوک> nasopharyngeal swab> oropharyngeal swab> خون۔اس کے علاوہ پاخانے میں بھی وائرس کا پتہ لگایا جا سکتا ہے۔تاہم، آپریشن کی سہولت اور مریضوں کی قبولیت کو مدنظر رکھتے ہوئے، عام طور پر استعمال ہونے والے طبی نمونے کا آرڈر oropharyngeal swab>nasopharyngeal swab>bronchial lavage سیال (پیچیدہ آپریشن) اور گہری تھوک (عام طور پر خشک کھانسی، حاصل کرنا مشکل) ہے۔

اس لیے بعض مریضوں کے oropharynx یا nasopharynx کے خلیوں میں وائرس کی مقدار کم یا انتہائی کم ہوتی ہے۔اگر جانچ کے لیے صرف oropharynx یا nasopharynx کے نمونے لیے جائیں تو وائرل نیوکلک ایسڈ کا پتہ نہیں چل سکے گا۔

(2) نمونے جمع کرنے کے دوران کوئی وائرس پر مشتمل خلیات جمع نہیں کیے گئے، یا وائرل نیوکلک ایسڈ کو مؤثر طریقے سے محفوظ نہیں کیا گیا۔

[① جمع کرنے کی غلط جگہ، مثال کے طور پر، oropharyngeal swabs جمع کرتے وقت، جمع کرنے کی گہرائی کافی نہیں ہوتی، جمع کیے گئے nasopharyngeal swabs کو ناک کی گہا میں گہرائی میں جمع نہیں کیا جاتا، وغیرہ۔ جمع کیے گئے زیادہ تر خلیے وائرس سے پاک خلیات ہو سکتے ہیں۔

②سمپلنگ سویب غلط طریقے سے استعمال کیے جاتے ہیں۔مثال کے طور پر، PE فائبر، پالئیےسٹر فائبر اور پولی پروپیلین فائبر جیسے مصنوعی ریشوں کو جھاڑو کے سر کے مواد کے لیے تجویز کیا جاتا ہے۔قدرتی ریشے جیسے کہ روئی کا استعمال اصل آپریشن میں کیا جاتا ہے (پروٹین کا مضبوط جذب اور دھونا آسان نہیں ہوتا) اور نایلان ریشے (پانی کا ناقص جذب، جس کی وجہ سے نمونے لینے کا حجم ناکافی ہوتا ہے)؛

③وائرس اسٹوریج ٹیوبوں کا غلط استعمال، جیسے پولی پروپیلین یا پولی تھیلین پلاسٹک اسٹوریج ٹیوبوں کا غلط استعمال جو نیوکلک ایسڈز (DNA/RNA) کو جذب کرنے میں آسان ہیں، جس کے نتیجے میں سٹوریج کے محلول میں نیوکلک ایسڈ کے ارتکاز میں کمی واقع ہوتی ہے۔عملی طور پر، یہ سفارش کی جاتی ہے کہ وائرل نیوکلک ایسڈز کو ذخیرہ کرنے کے لیے پولی تھیلین-پروپیلین پولیمر پلاسٹک اور کچھ خاص طور پر علاج شدہ پولی پروپیلین پلاسٹک کنٹینرز استعمال کریں۔]

[① جمع کرنے کی غلط جگہ، مثال کے طور پر، oropharyngeal swabs جمع کرتے وقت، جمع کرنے کی گہرائی کافی نہیں ہوتی، جمع کیے گئے nasopharyngeal swabs کو ناک کی گہا میں گہرائی میں جمع نہیں کیا جاتا، وغیرہ۔ جمع کیے گئے زیادہ تر خلیے وائرس سے پاک خلیات ہو سکتے ہیں۔

②سمپلنگ سویب غلط طریقے سے استعمال کیے جاتے ہیں۔مثال کے طور پر، PE فائبر، پالئیےسٹر فائبر اور پولی پروپیلین فائبر جیسے مصنوعی ریشوں کو جھاڑو کے سر کے مواد کے لیے تجویز کیا جاتا ہے۔قدرتی ریشے جیسے کہ روئی کا استعمال اصل آپریشن میں کیا جاتا ہے (پروٹین کا مضبوط جذب اور دھونا آسان نہیں ہوتا) اور نایلان ریشے (پانی کا ناقص جذب، جس کی وجہ سے نمونے لینے کا حجم ناکافی ہوتا ہے)؛

③وائرس اسٹوریج ٹیوبوں کا غلط استعمال، جیسے پولی پروپیلین یا پولی تھیلین پلاسٹک اسٹوریج ٹیوبوں کا غلط استعمال جو نیوکلک ایسڈز (DNA/RNA) کو جذب کرنے میں آسان ہیں، جس کے نتیجے میں سٹوریج کے محلول میں نیوکلک ایسڈ کے ارتکاز میں کمی واقع ہوتی ہے۔عملی طور پر، یہ سفارش کی جاتی ہے کہ وائرل نیوکلک ایسڈز کو ذخیرہ کرنے کے لیے پولی تھیلین-پروپیلین پولیمر پلاسٹک اور کچھ خاص طور پر علاج شدہ پولی پروپیلین پلاسٹک کنٹینرز استعمال کریں۔]

(4) کلینیکل لیبارٹری آپریشن معیاری نہیں ہے۔نمونے کی نقل و حمل اور ذخیرہ کرنے کے حالات، طبی لیبارٹریوں کا معیاری آپریشن، نتائج کی تشریح اور کوالٹی کنٹرول ٹیسٹ کے نتائج کی درستگی اور وشوسنییتا کو یقینی بنانے کے کلیدی عوامل ہیں۔16-24 مارچ 2020 کو نیشنل ہیلتھ کمیشن کے کلینیکل لیبارٹری سنٹر کے ذریعہ کئے گئے بیرونی معیار کی جانچ کے نتائج کے مطابق درست نتائج حاصل کرنے والی 844 لیبارٹریوں میں سے 701 (83.1%) اہل تھیں، اور 143 (16.9%) نہیں تھیں۔اہل، مجموعی لیبارٹری ٹیسٹنگ کے حالات اچھے ہیں، لیکن مختلف لیبارٹریوں میں اب بھی عملے کے آپریشن کی صلاحیت، واحد ہدف مثبت نمونے کی تشریح کی صلاحیت، اور کوالٹی کنٹرول میں فرق ہے۔

SARS-CoV-2 نیوکلک ایسڈ کا پتہ لگانے کے جھوٹے منفی کو کیسے کم کیا جائے؟

نیوکلیک ایسڈ کا پتہ لگانے میں جھوٹے منفی کو کم کرنے کو جھوٹے منفی پیدا کرنے کے چار پہلوؤں سے بہتر بنایا جانا چاہئے۔

(1) متاثرہ شخص کے خلیوں میں وائرس کی ایک خاص مقدار ہوتی ہے۔مشتبہ متاثرہ افراد کے جسم کے مختلف حصوں میں وائرس کا ارتکاز مختلف اوقات میں مختلف ہوگا۔اگر گردن نہیں ہے، تو یہ برونکیل lavage سیال یا پاخانہ میں ہو سکتا ہے۔اگر جانچ کے لیے ایک ہی وقت میں یا بیماری کے بڑھنے کے مختلف مراحل پر متعدد قسم کے نمونے جمع کیے جا سکتے ہیں، تو غلط منفی سے بچنے میں مدد ملے گی۔

(2) نمونے جمع کرنے کے دوران وائرس پر مشتمل خلیات کو جمع کیا جائے۔نمونے جمع کرنے والوں کی تربیت کو مضبوط بنا کر اس مسئلے کو کافی حد تک حل کیا جا سکتا ہے۔

(3) قابل اعتماد IVD ری ایجنٹس۔قومی سطح پر ری ایجنٹس کی کارکردگی کی تشخیص پر تحقیق کر کے، اور موجودہ مسائل پر بحث کر کے، ری ایجنٹس کی کھوج کی کارکردگی کو مزید بہتر بنایا جا سکتا ہے اور تجزیہ کی حساسیت کو بہتر بنایا جا سکتا ہے۔

(4) طبی لیبارٹریوں کا معیاری آپریشن۔لیبارٹری کے اہلکاروں کی تربیت کو مضبوط بنا کر، لیبارٹری کے معیار کے انتظام کے نظام کو مسلسل بہتر بنا کر، معقول تقسیم کو یقینی بنا کر، اور اہلکاروں کی شناخت کرنے کی صلاحیت کو بہتر بنا کر، لیبارٹری کے غلط آپریشنز کی وجہ سے غلط منفی کو کم کرنا ممکن ہے۔

صحت یاب اور ڈسچارج ہونے والے مریضوں میں SARS-CoV-2 نیوکلک ایسڈ ٹیسٹ کے دوبارہ ٹیسٹ مثبت آنے کی وجوہات

"COVID-19 تشخیص اور علاج کا منصوبہ (آزمائشی ساتواں ایڈیشن)" واضح طور پر بتاتا ہے کہ COVID-19 کے مریضوں کے صحت یاب ہونے اور ہسپتال سے ڈسچارج ہونے کے لیے ایک معیار یہ ہے کہ سانس کی نالی کے دو لگاتار نمونوں میں نیوکلک ایسڈ کا ٹیسٹ منفی ہوتا ہے (کم از کم 24 گھنٹے کے فاصلے پر)، لیکن SA-2 کے مختلف ایسڈ ایسڈ کی وجہ سے بہت کم مریضوں کی وجہ سے مختلف ایسڈ ایسڈ کی وجہ سے بہت کم تھے۔ وجوہات

(1)SARS-CoV-2 ایک نیا وائرس ہے۔اس کے روگجنک طریقہ کار، بیماری کی مکمل تصویر اور بیماری کے کورس کی خصوصیات کو مزید سمجھنا ضروری ہے۔لہذا، ایک طرف، یہ ضروری ہے کہ ڈسچارج مریضوں کے انتظام کو مضبوط کیا جائے اور 14 دن کا طبی مشاہدہ کیا جائے۔بیماری کی موجودگی، نشوونما اور نتائج کے پورے عمل کو سمجھنے کے لیے فالو اپ، صحت کی نگرانی اور صحت کی رہنمائی کریں۔

(2)مریض دوبارہ وائرس سے متاثر ہو سکتا ہے۔ماہر تعلیم ژونگ نانشن نے کہا: چونکہ صحت یاب ہونے والے مریضوں میں اینٹی باڈیز ہوتی ہیں، اس لیے جب وہ دوبارہ حملہ کرتے ہیں تو SARS-CoV-2 کو اینٹی باڈیز کے ذریعے ختم کیا جا سکتا ہے۔اس کی بہت سی وجوہات ہیں، جو کہ صحت یاب ہونے والے مریض کی وجہ ہوسکتی ہیں، یا اس کا تعلق وائرس کی تبدیلی سے ہوسکتا ہے، یا لیبارٹری ٹیسٹنگ کی وجہ بھی ہوسکتی ہے۔اگر یہ خود وائرس ہے تو، SARS-CoV-2 کی تبدیلی کی وجہ سے صحت یاب ہونے والے مریض کے ذریعے تیار کردہ اینٹی باڈی تبدیل شدہ وائرس کے خلاف غیر موثر ہو سکتی ہے۔اگر مریض دوبارہ تبدیل شدہ وائرس سے متاثر ہوتا ہے، تو نیوکلک ایسڈ ٹیسٹ دوبارہ مثبت ہوسکتا ہے۔

(3) جہاں تک لیبارٹری جانچ کے طریقوں کا تعلق ہے، ہر جانچ کے طریقہ کار کی اپنی حدود ہیں۔SARS-CoV-2 نیوکلک ایسڈ کا پتہ لگانے کی وجہ جین کی ترتیب کے انتخاب، ری ایجنٹس کی ترکیب، طریقہ کار کی حساسیت اور دیگر وجوہات ہیں، جس کی وجہ سے موجودہ کٹس کی اپنی شناخت کی حدیں کم ہیں۔مریض کے علاج کے بعد جسم میں وائرس کم ہو جاتا ہے۔جب ٹیسٹ کیے جانے والے نمونے میں وائرل لوڈ پتہ لگانے کی نچلی حد سے نیچے ہو تو ایک "منفی" نتیجہ ظاہر ہوگا۔تاہم، اس نتیجے کا مطلب یہ نہیں ہے کہ جسم میں وائرس مکمل طور پر غائب ہو گیا ہے.وائرس علاج بند ہونے کے بعد ہوسکتا ہے۔دوبارہ پیدا ہونا”، کاپی کرنا جاری رکھیں۔لہذا، ڈسچارج کے بعد 2 سے 4 ہفتوں کے اندر ہفتے میں ایک بار جائزہ لینے کی سفارش کی جاتی ہے۔

(4) نیوکلک ایسڈ وائرس کا جینیاتی مواد ہے۔وائرس مریض کے اینٹی وائرل علاج سے گزرنے کے بعد مارا جاتا ہے، لیکن باقی وائرل آر این اے کے ٹکڑے اب بھی انسانی جسم میں برقرار رہتے ہیں، اور جسم سے مکمل طور پر خارج نہیں ہوتے ہیں۔بعض اوقات، بعض حالات میں، اسے زیادہ برقرار رکھا جا سکتا ہے۔ایک طویل وقت، اور اس وقت نیوکلک ایسڈ ٹیسٹ "عارضی" مثبت ہوگا۔مریض کے صحت یاب ہونے کے وقت میں توسیع کے بعد، جسم میں بقایا RNA کے ٹکڑوں کے آہستہ آہستہ ختم ہونے کے بعد، نیوکلک ایسڈ ٹیسٹ کا نتیجہ منفی ہو سکتا ہے۔

(5) SARS-CoV-2 کے نیوکلک ایسڈ ٹیسٹ کا نتیجہ صرف وائرل RNA کی موجودگی یا غیر موجودگی کو ثابت کرتا ہے، اور یہ ثابت نہیں کر سکتا کہ وائرس کی سرگرمی اور کیا وائرس قابل منتقلی ہے۔یہ ثابت کرنا ضروری ہے کہ کیا ایک مریض جس کا نیوکلیک ایسڈ کا دوبارہ ٹیسٹ مثبت آیا ہے وہ دوبارہ انفیکشن کا ذریعہ بن جائے گا۔طبی نمونوں پر وائرس کی ثقافت کو انجام دینے اور یہ ثابت کرنے کے لیے کہ یہ متعدی ہے ایک "زندہ" وائرس کاشت کرنا ضروری ہے۔

خلاصہ

خلاصہ طور پر، SARS-CoV-2 نیوکلک ایسڈ ٹیسٹ جھوٹے منفی، دوبارہ ٹیسٹ مثبت، اور دیگر حالات جو طبی توضیحات سے مطابقت نہیں رکھتے ہیں، مکمل طور پر گریز نہیں کیا جا سکتا۔اصل اسکریننگ اور ٹیسٹنگ میں، یہ تجویز کیا جاتا ہے کہ طبی علامات، امیجنگ امتحانات (CT) اور تجربات لیبارٹری ٹیسٹ (نیوکلک ایسڈ ٹیسٹ + وائرس سے متعلق مخصوص اینٹی باڈی ٹیسٹ) کے نتائج کو جامع تشخیص کے لیے یکجا کیا جائے تاکہ گم شدہ تشخیص اور غلط تشخیص کو روکا جا سکے۔اگر ٹیسٹ کے نتائج واضح طور پر کلینیکل مظاہر سے مطابقت نہیں رکھتے ہیں، تو یہ سفارش کی جاتی ہے کہ SARS-CoV-2 وائرس کے ابتدائی انفیکشن، بار بار ہونے والے انفیکشن یا سانس کے دیگر ممکنہ وائرس کے انفیکشن وغیرہ کے ساتھ مل کر مکمل ٹیسٹ لنک (نمونہ جمع کرنے، گردش اور پروسیسنگ لنکس) کا ایک جامع تجزیہ کریں۔اگر حالات اجازت دیتے ہیں تو، دوبارہ جانچ کے لیے زیادہ حساس نمونے جیسے تھوک یا الیوولر لیویج فلوئڈ کو جمع کرنے کی سفارش کی جاتی ہے۔

متعلقہ مصنوعات:

SARS-CoV-2 نیوکلک ایسڈ ڈیٹیکشن کٹ (ملٹی پلیکس پی سی آر فلوروسینٹ پروب طریقہ)