-
جانوروں کے ٹشو براہ راست پی سی آر کٹ- UNG
یہ کٹ پی سی آر کے رد عمل کے ل animal جانوروں کے ٹشووں کے نمونوں سے جینومک ڈی این اے کو جلدی سے جاری کرنے کے لئے ایک انوکھا لیزاس بفر سسٹم استعمال کرتی ہے ، لہذا یہ خاص طور پر بڑے پیمانے پر جینیاتی جانچ کے ل suitable موزوں ہے۔
لیسس بفر سے جینومک ڈی این اے کو جاری کرنے کا عمل 10-30 منٹ کے اندر 65 پر مکمل ہوتا ہے°C. پروٹین اور آر این اے کو ہٹانے جیسے کسی اور عمل کی ضرورت نہیں ہے ، اور جاری کردہ ٹریس ڈی این اے کو پی سی آر کے رد عمل کے نمونے کے طور پر استعمال کیا جاسکتا ہے۔
2×پی سی آر ایزیٹ م مکس (یو این جی) 2 کی بنیاد پر ڈی ٹی ٹی پی کی بجائے ڈی یو ٹی پی کا استعمال کرتا ہے×پی سی آر ایزیٹ م مکس کریں ، اور UNG ینجائم (Uracil-N-glycosylase) شامل کریں جو ایک ہی وقت میں DUTP پر مشتمل ٹیمپلیٹ کو ہٹا سکتا ہے۔ پی سی آر کے رد عمل سے پہلے ، یو این جی انزیم کا استعمال پی سی آر پروڈکٹ کو ہراساں کرنے کے لئے کیا جاتا ہے جس میں یوریکل شامل ہے۔ یو این جی انزیم کا اس سانچے پر کوئی اثر نہیں پڑے گا جس میں یوریکل شامل نہیں ہے ، اس طرح طول و عرض کی خصوصیت اور درستگی کو یقینی بنائے گا اور بڑے پیمانے پر جینیاتی جانچ کے دوران پی سی آر مصنوعات کی آلودگی کے امکان کو روکے جاسکے۔
ڈی-تق ڈی این اے پولیمریج ایک ڈی این اے پولیمریج ہے جو خصوصی طور پر فورجین نے براہ راست پی سی آر رد عمل کے ل for تیار کیا ہے۔ ڈی-تق ڈی این اے پولیمریز مختلف قسم کے پی سی آر رد عمل روکنے والوں کے ساتھ سخت رواداری رکھتا ہے ، اور مختلف پیچیدہ رد عمل کے نظاموں میں ڈی این اے کی ٹریس مقدار کو موثر انداز میں بڑھا سکتا ہے ، اور طول و عرض کی رفتار 2Kb / منٹ تک پہنچ سکتی ہے ، جو خاص طور پر براہ راست پی سی آر رد عمل کے ل suitable موزوں ہے۔
